一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠腹腔主动脉平滑肌细胞(Rat Abdominal Aortic Smooth Muscle Cells)
- 细胞别称:RAASMC;主动脉平滑肌细胞;血管平滑肌细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
- 组织来源:腹腔主动脉中膜层(经酶消化法分离纯化)
- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或纤连蛋白包被培养器皿)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,呈典型“峰谷”样排列
- 细胞代数:P3 - P8(保证收缩功能与表型稳定性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:平滑肌细胞专用培养基(含10% FBS+生长因子添加剂)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养基成分及细胞密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基混匀离心后接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒,静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每4 - 5天传代一次)
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙扩大后终止
- 注意事项
- 避免机械刮取(防止细胞骨架损伤)
- 传代后12小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P5代细胞应维持平滑肌特异性标志物表达)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度监控数据)
- 3天内证实支原体或细菌污染(需提供第三方检测报告)
- 细胞活力低于85%(台盼蓝染色法)
- 细胞标志物检测与描述不符
- 不予重发情形
- 收货后未按规范立即处理(如超72小时未复苏)
- 自行更改培养基配方导致细胞状态异常
- 未按推荐传代方法造成细胞损伤
- 实验操作污染导致的细胞问题