一、细胞基本属性
- 细胞名称:大鼠颈动脉内皮细胞(Rat Carotid Artery Endothelial Cells)
- 细胞别称:RCAEC;颈动脉内皮细胞;动脉内皮细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
- 组织来源:颈动脉段血管组织
- 生长特性:贴壁生长(需包被明胶或纤维连接蛋白)
- 细胞形态:单层铺路石样排列,融合后呈现典型多角形镶嵌结构
- 细胞代数:P3 - P8(推荐使用代数,确保功能稳定及低变异率)
- 细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:大鼠内皮细胞专用培养基(含5% FBS及内皮生长因子组合)
- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约36 - 48小时(与接种密度及基质条件相关)
- 供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或活体实验。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理:冻存管需37℃水浴快速解冻,加入3mL预温培养基轻柔混匀;培养瓶经酒精消毒后静置于培养箱1小时适应环境。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例:1:2至1:3(建议初始接种密度为4×10³ cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA溶液,37℃消化30 - 60秒,显微镜下观察到细胞间隙扩大后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项:避免消化时间过长导致细胞膜损伤;传代后12小时内更换新鲜培养基以清除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)。
- 细胞密度:推荐冻存浓度为1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤:离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管,按梯度降温程序保存(4℃ 30分钟→ - 20℃ 1小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存)。
- 复苏验证:复苏后24小时内检测细胞存活率(台盼蓝染色≥90%);功能验证包括CD31免疫荧光鉴定及体外血管形成实验(P5代细胞需保持管腔形成能力)。
四、售后服务承诺
- 重发标准:
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活(需提供物流温度记录);
- 收货3天内经PCR证实支原体污染或细菌污染;
- 复苏后存活率低于85%(需提供台盼蓝染色图像);
- 物种鉴定结果与大鼠源性不符。
- 不予重发情形:
- 细胞解冻后超过48小时未进行培养;
- 使用非指定培养基或擅自修改培养条件;
- 因反复冻融或不当操作导致的细胞损伤;
- 未按规范进行污染检测直接用于实验。