一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠冠状动脉平滑肌细胞(Rat Coronary Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称:RCASMC;冠状动脉平滑肌细胞;冠脉SMC
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心血管疾病史)
组织来源:冠状动脉中膜段
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质及特定生长因子)
细胞形态:典型长梭形或纺锤形,单层排列呈束状
细胞代数:P3 - P8(确保收缩功能及标志物表达稳定性)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+平滑肌细胞生长添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(依赖培养基成分及细胞密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验。
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
培养瓶:75%酒精擦拭表面后静置于培养箱2小时,待温度平衡。
传代标准:细胞融合度达90% - 95%(通常每3 - 5天传代一次)。
传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)。
消化方法:
使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02% EDTA)。
37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞回缩后立即加入含血清培养基终止。
注意事项:
避免消化时间过长(防止细胞骨架蛋白损伤)。
传代后12 - 24小时更换培养基以去除死细胞及消化残留物。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)。
细胞密度:冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤:
离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
梯度降温:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
复苏验证:
复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥95%为合格)。
功能验证:α - SMA免疫荧光染色及钙离子刺激收缩实验(P5代细胞需维持收缩特性)。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程中干冰耗尽或温度记录异常导致细胞死亡(需提供温度监控记录)。
2. 收货3天内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)。
3. 复苏后细胞存活率低于90%(台盼蓝染色法)。
4. 标志物鉴定结果与说明不符(需提供第三方检测报告)。
不予重发情形:
1. 收货后超过72小时未进行复苏操作。
2. 使用非指定培养基或添加未经验证的生长因子。
3. 未按规范进行传代导致细胞功能丧失。
4. 未执行推荐的支原体检测流程直接开展实验。