一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠主动脉平滑肌细胞(Rat Aortic Smooth Muscle Cells)
细胞别称:RAoSMC;主动脉SMC;血管平滑肌细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别可选,供体经心血管病理学筛查)
组织来源:胸主动脉中膜层分离
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被表面)
细胞形态:典型长梭形或纺锤状,平行排列呈现“峰谷”样结构
细胞代数:P3 - P10(经α - SMA免疫荧光验证表型稳定性)
细胞规格:5×10⁴ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+胰岛素 - 转铁蛋白 - 硒添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无动物成分冻存液(含10% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与传代密度及培养基批次相关)
供应限制:仅限体外研究使用,不适用于体内移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴轻摇解冻,加入3mL预温培养基离心洗涤;培养瓶:表面消毒后静置培养箱4小时再换液
传代标准:细胞融合度达70% - 80%(高密度易引发表型转化)
传代比例:1:3常规传代(最低接种密度1×10³ cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,震荡可见细胞层脱离立即终止
注意事项:消化后需5分钟低速离心(200×g)去除酶残留;首次传代建议添加2mM CaCl₂维持收缩蛋白完整性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及胎牛血清替代物)
细胞密度:推荐冻存浓度:5×10⁵ cells/mL
冻存步骤:离心后缓慢滴加冻存液混匀;程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存
复苏验证:复苏后48小时进行α - SMA免疫荧光染色(阳性率应>90%)
功能验证:钙离子刺激收缩实验(P5代细胞需保持收缩响应性)
四、售后服务承诺
重发标准:1.物流温度记录显示超温事件(需提供温度追踪报告);2.到货72小时内PCR检测证实支原体污染;3.细胞贴壁率低于80%(需提供明场显微照片);4.种属鉴定与标识不符
不予重发情形:1.未使用原代胶原包被培养器皿;2.擅自添加VEGF等内皮生长因子改变表型;3.培养环境温度波动超过±1℃持续24小时;4.未进行周期性血清饥饿处理导致异常增殖
注:本产品需配合专用基质胶使用,常规培养建议每两周进行一次肌动蛋白应力纤维染色监测分化状态