一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠心肌成纤维细胞(Rat Cardiac Fibroblasts)
细胞别称:心脏成纤维细胞;心肌间质细胞;心肌基质细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体筛选无心脏疾病史)
组织来源:心肌组织间质
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或不规则星状,汇合后呈网状排列
细胞代数:P2 - P6(推荐使用代数以保证功能稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+1%成纤维细胞生长因子添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~24 - 48小时(依赖血清浓度及细胞密度)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴解冻后,加入3mL预热培养基离心洗涤
培养瓶:酒精消毒表面,静置培养箱1小时后更换新鲜培养基
传代标准:细胞融合度达90% - 95%(贴壁致密呈网状时传代)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02%胶原酶)
37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项:
消化终止需加入含血清培养基并轻柔吹打
首次传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含8% DMSO及能量代谢保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心后重悬细胞,分装至冻存管
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存
复苏验证:
复苏后48小时检测细胞贴壁率(应≥85%)
功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P3代细胞应保持活化特性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度记录异常导致细胞死亡(需提供物流温度曲线)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 细胞贴壁率低于80%(需提供相差显微镜图像)
4. 物种鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 收货后未立即执行复苏操作(超过48小时)
2. 自行修改培养基配方导致细胞分化异常
3. 超代次使用(超过P6代)引发功能退化
4. 未按规范进行细胞鉴定直接用于共培养实验
(注:以上内容基于标准操作流程,实际培养效果可能因实验条件差异需优化参数)