一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠心室心肌细胞
细胞别称:心室肌细胞;心肌工作细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康乳鼠(出生1 - 3天,性别混合)
组织来源:心室心肌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:梭形或不规则三角形,可见横纹结构
细胞代数:原代细胞(P0 - P2代内保持节律性收缩能力)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25胶原包被培养瓶或1mL冻存管
培养基:心肌细胞专用培养基(含5% FBS+心肌营养因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清心肌细胞冻存液(含DMSO及代谢抑制剂),液氮长期保存
倍增时间:原代细胞不增殖(功能维持期约7 - 14天)
供应限制:仅用于心血管疾病机制研究,不可用于药物筛选或移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴解冻后立即离心去除冻存液,重悬于预热培养基
- 培养瓶:静置培养箱4小时后首次换液
传代标准:原代细胞不建议传代(实验建议直接使用P0代细胞)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶+0.1%胶原酶混合消化液
- 37℃消化8 - 12分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
注意事项:
- 全程保持培养基pH值稳定(pH波动易导致细胞停止搏动)
- 换液时保留50%原培养基以维持细胞节律性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:专用心肌细胞冻存液(含5% DMSO+能量代谢底物)
冻存密度:1×10⁶ cells/mL(高密度维持细胞间电耦联)
冻存步骤:
- 消化后细胞经梯度降温程序:4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃过夜
- 最终转移至气相液氮长期保存
复苏验证:
- 搏动频率检测:复苏后48小时内应恢复0.5 - 1.2Hz自发搏动
- 特异性标记检测:α - actinin免疫荧光阳性率≥90%
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程温度记录异常(需提供温度追踪数据)
2. 到货72小时内证实微生物污染(需提供无菌检测报告)
3. 复苏后搏动细胞比例<60%(需提供视频记录)
4. 心肌特异性标志物表达异常
不予重发情形:
1. 使用非胶原包被培养器皿导致细胞脱落
2. 培养环境CO₂浓度超过5%造成pH失衡
3. 未按规范进行钙离子浓度调控引发细胞钙超载
4. 擅自进行传代操作导致细胞功能丧失
注:本产品需配合心肌细胞搏动记录系统使用,建议在分离后7日内完成关键实验。培养过程中需每日观察细胞收缩节律,定期检测乳酸脱氢酶释放量评估细胞损伤程度。