一、细胞基本属性
1. 细胞名称:大鼠心房心肌细胞(Rat Atrial Cardiomyocytes)
2. 细胞别称:Atrial Cardiomyocytes;心房肌细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别依实验需求定制)
5. 组织来源:心房组织分离纯化
6. 生长特性:贴壁生长(需专用心肌细胞培养基及基质预处理)
7. 细胞形态:典型长梭形或多角形,可见自发性节律性收缩
8. 细胞代数:原代细胞(P0)或传代细胞(P1 - P3,建议使用原代细胞以保留收缩功能)
9. 细胞规格:5×10⁵ cells/T25专用培养瓶或1mL冻存管(含心肌细胞专用冻存液)
10. 培养基:Cardiomyocyte Maintenance Medium(含5% FBS +心肌细胞特异性生长因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂+ 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清心肌细胞专用冻存液(含DMSO及抗氧化剂),- 150℃以下长期保存
13. 倍增时间:原代细胞不增殖,传代细胞增殖能力有限
14. 供应限制:仅限体外科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面后静置培养箱4小时平衡
2. 传代标准:原代细胞不建议传代,传代细胞融合度达80%时操作
3. 消化方法
- 使用0.1%胶原酶II型+0.02%胰酶混合消化液
- 37℃消化8 - 12分钟,轻柔吹打至细胞脱离
4. 注意事项
- 严格控制消化时间(心肌细胞膜脆弱易损伤)
- 终止消化后需低速离心(100×g,3分钟)保留收缩功能
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:心肌细胞专用无血清冻存液(含10%DMSO及能量代谢底物)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤
- 消化后细胞经低速离心收集,轻柔重悬于冻存液
- 程序降温:4℃平衡30分钟→专用冻存盒 - 80℃过夜→液氮长期保存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时内检测搏动频率(原代细胞需维持>30次/分钟)
- 免疫荧光鉴定:cTnT阳性率≥90%,Connexin43表达正常
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 干冰运输全程温度≥ - 150℃仍出现细胞活力<80%(需提供温度记录)
- 到货72小时内经qPCR证实交叉污染或微生物污染
- 原代细胞搏动功能缺失(需提供视频记录)
2. 不予重发情形
- 使用非配套培养基或机械吹打导致细胞损伤
- 未按规范进行胶原酶消化致细胞膜完整性破坏
- 传代次数超过P3后功能异常
- 未使用专用程序冻存导致冰晶损伤
3. 补充说明:所有操作需遵守实验室生物安全二级标准,建议使用前完成心肌细胞特异性标志物鉴定