一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠肺成纤维细胞（Rat Lung Fibroblasts）
- 细胞别称：RLF；肺成纤维细胞；肺间质成纤维细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肺部疾病史）
- 组织来源：肺组织（分离自肺间质或肺泡隔）
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质支持）
- 细胞形态：典型长梭形或不规则三角形，呈放射状排列
- 细胞代数：P3 - P8（确保功能活性及遗传稳定性）
- 细胞规格：1×10⁵ cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+成纤维细胞生长添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（依培养密度及营养条件波动）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：75%酒精表面消毒，静置培养箱2小时适应
- 传代标准：细胞融合度达80%-90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化2 - 3分钟，细胞边缘卷曲后立即终止
- 注意事项
- 避免消化过度（影响细胞外基质分泌能力）
- 传代后12小时补充新鲜培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 离心收集细胞，轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时存活率≥95%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：胶原分泌检测或CCK - 8增殖实验（P5代细胞应保持活性）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）
- 收货3日内确认支原体/细菌污染（需提供检测报告）
- 复苏后存活率低于90%（需提供染色检测图像）
- 种属鉴定结果不符（需提供PCR或免疫荧光证据）
- 不予重发情形
- 客户延迟复苏超过48小时
- 使用非推荐培养基或自行修改培养条件
- 未按规范进行冻存或反复冻融
- 未进行污染检测直接用于实验
