一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠支气管平滑肌细胞（Rat Bronchial Smooth Muscle Cells）
- 细胞别称：RBSMC；支气管平滑肌细胞；气道平滑肌细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
- 组织来源：支气管组织平滑肌层
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤形，平行排列生长
- 细胞代数：P3 - P8（确保收缩功能与生理特性稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：Smooth Muscle Cell Medium（含5% FBS+平滑肌细胞特异性生长因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~48 - 72小时（受细胞密度及培养基组分影响）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡2小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每4 - 5天传代一次）
- 传代比例：1:2至1:3（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含弱胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止
- 注意事项：
- 避免过度消化（保护细胞膜表面受体完整性）
- 传代后48小时内避免频繁观察以降低机械扰动
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及营养保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时检测存活率（台盼蓝染色法，存活率≥90%）
- 功能验证：乙酰胆碱刺激收缩实验（P5代细胞应保持钙离子响应能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 1. 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）
- 2. 7日内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 3. 复苏后存活率低于90%（需提供台盼蓝染色图像）
- 4. 种属鉴定与大鼠特异性标记物检测不符
- 不予重发情形：
- 1. 收货后超过72小时未规范复苏
- 2. 使用非推荐培养基或添加未经验证成分
- 3. 反复冻融或离心转速过高导致细胞损伤
- 4. 未按标准流程进行污染检测直接用于实验
