一、细胞基本属性:
1. 细胞名称:大鼠支气管上皮细胞(Rat Bronchial Epithelial Cells)
2. 细胞别称:RBEpiC;支气管上皮细胞;气道上皮细胞
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无呼吸道疾病史)
5. 组织来源:支气管组织(经酶消化法分离纯化)
6. 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或纤维连接蛋白包被培养器皿)
7. 细胞形态:单层铺路石样排列,接触抑制后呈多角形或立方状
8. 细胞代数:P3 - P8(确保功能活性及遗传稳定性)
9. 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
10. 培养基:支气管上皮细胞专用培养基(含2% FBS + 表皮生长因子 + 胰岛素样生长因子)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存
13. 倍增时间:约48 - 72小时(受培养密度及包被基质影响)
14. 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南:
1. 收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时平衡温湿度。
2. 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每3 - 4天传代)
3. 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
4. 消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA(含低浓度蛋白酶抑制剂)。
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止。
5. 注意事项:
- 避免剧烈吹打(保护细胞表面纤毛结构)。
- 传代后12小时内更换新鲜培养基以清除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范:
1. 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 海藻糖保护剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
3. 冻存步骤:
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
4. 复苏验证:
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%为合格)。
- 功能验证:免疫荧光检测角蛋白表达(P5代细胞应维持上皮特性)
四、售后服务承诺:
1. 重发标准:
- 运输过程温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)。
- 收到后72小时内证实微生物污染(需提供污染检测证据)。
- 细胞复苏存活率低于90%(台盼蓝染色结果)。
- 物种鉴定与标识不符(需提供PCR检测报告)。
2. 不予重发情形:
- 客户收货后超72小时未及时复苏。
- 使用非推荐培养基或未按规范包被培养器皿。
- 实验操作不当导致细胞机械损伤或功能丧失。
- 未定期检测支原体即进行后续实验。
- 本产品符合国际细胞培养标准,提供STR鉴定报告及支原体检测阴性证明。