一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠气管平滑肌细胞
- 细胞别称：RTSMC；气管平滑肌细胞；气道平滑肌细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
- 组织来源：气管组织平滑肌层
- 生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质成分）
- 细胞形态：长梭形或纺锤形，融合后呈束状排列
- 细胞代数：P3 - P5（保证功能活性与收缩特性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：平滑肌细胞专用培养基（含10% FBS+平滑肌细胞生长因子添加剂）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~72 - 96小时（依赖培养密度与生长因子浓度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面后静置培养箱1小时平衡温湿度。
- 传代标准：细胞融合度达90% - 95%（通常每4 - 5天传代一次）。
- 传代比例：1:2至1:3（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后终止消化。
- 注意事项：
- 避免机械刮擦损伤细胞膜（影响收缩功能）。
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶（保障贴壁稳定性）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及能量代谢保护剂）。
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液。
- 梯度降温：4℃ 20min → -20℃ 1.5h → -80℃过夜 → 转入液氮。
- 复苏验证：
- 复苏后48小时台盼蓝染色检测存活率（保证≥90%）。
- 功能验证：α - 平滑肌肌动蛋白（α - SMA）免疫荧光染色（P3代细胞阳性率≥95%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度记录异常导致细胞死亡（需提供物流温度监控截图）。
- 到货7天内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）。
- 细胞复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色结果）。
- 种属鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行预培养或传代操作。
- 使用非推荐培养基导致细胞功能异常（如收缩能力丧失）。
- 未定期进行支原体检测引发交叉污染。
- 液氮保存设备故障导致的细胞失活。
