一、细胞基本属性
细胞名称：大鼠气管上皮细胞（Rat Tracheal Epithelial Cells）
细胞别称：RTEC；气管上皮细胞；呼吸道上皮细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康成年鼠（性别不限，供体筛选无呼吸道疾病史）
组织来源：气管组织上皮层
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：单层铺路石样排列，接触抑制后呈现多角形或鳞状
细胞代数：P3 - P8（确保功能稳定性和分化潜能）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含专用无血清冻存液）
培养基：上皮细胞专用培养基（含2%胎牛血清+表皮生长因子+气液界面诱导添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
倍增时间：约48 - 72小时（受细胞密度及培养条件影响）
供应限制：仅限科学研究使用，不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
• 冻存管接收后立即37℃水浴快速解冻，加入5mL预温培养基轻柔混匀
• 培养瓶运输时需用75%酒精擦拭外壁，静置于培养箱中平衡1小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每3 - 4天进行传代操作）
传代比例：1:2至1:3（推荐初始接种密度为4×10³ cells/cm²）
消化方法：
• 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（不含Ca²⁺/Mg²⁺）
• 37℃消化2 - 3分钟，显微镜下观察到细胞间隙增大后立即终止反应
注意事项：
• 严格控制消化时间以保护细胞间紧密连接蛋白
• 首次换液需在传代后12小时内完成，后续每48小时更换新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透压稳定剂）
细胞密度：推荐冻存浓度为1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
• 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
• 程序降温：4℃平衡30分钟 → - 20℃预冷2小时 → 转移至 - 80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证：
• 复苏后24小时内进行台盼蓝染色检测，存活率需≥90%
• 功能验证：角蛋白免疫荧光染色（P5代细胞应保持典型上皮标志物表达）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供包装完整性证明）
2. 收到细胞72小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏存活率低于承诺标准（需提供台盼蓝染色视频记录）
4. 物种鉴定结果与所描述不符（需提供STR检测原始数据）
不予重发情形：
1. 未按规范进行细胞复苏（如超时解冻或高温处理）
2. 使用非指定培养基导致细胞形态异常
3. 未执行推荐传代操作引起的增殖停滞
4. 未经我方确认自行开展基因改造实验造成的功能异常
注：所有技术参数基于标准培养条件建立，实际应用需根据具体实验体系优化。建议定期进行角蛋白染色及跨膜电阻检测以监控细胞分化状态
