一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肺动脉外膜成纤维细胞(Rat Pulmonary Artery Adventitial Fibroblasts)
细胞别称:RPAF;肺动脉外膜成纤维细胞;血管外膜细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,无心血管疾病史)
组织来源:肺动脉外膜层
生长特性:贴壁生长(依赖胶原蛋白包被培养器皿)
细胞形态:长梭形或不规则三角形,具典型成纤维细胞特征
细胞代数:P3 - P8(确保增殖活性与功能稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(无血清冻存体系)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+双抗+生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(受细胞密度与培养条件影响)
供应限制:仅限科学研究使用,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管复苏:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀
培养瓶处理:75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(推荐传代周期2 - 3天)
传代比例:1:2至1:3(建议接种密度3×10³ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
严格控制消化时间以防细胞外基质过度分解
传代后12小时首次换液清除残余消化酶
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期储存
复苏验证:
复苏后12小时台盼蓝检测存活率(标准≥90%)
功能验证:α - SMA免疫荧光染色确认肌成纤维细胞转化潜能
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度异常导致细胞失活(需提供运输温度记录)
2. 到货3日内证实微生物污染(需提供检测报告)
3. 复苏存活率低于承诺值(按台盼蓝检测结果)
4. 物种鉴定与标识不符(COI检测报告为据)
不予重发情形:
1. 未按规范进行细胞复苏操作
2. 使用非指定培养基或培养条件
3. 反复冻融导致细胞损伤
4. 未执行定期支原体检测引发交叉污染