一、细胞基本属性
细胞名称:大鼠肺动脉平滑肌细胞(Rat Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells)
细胞别称:RPASMC;肺动脉平滑肌细胞;肺血管SMC
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年鼠(性别均一化选择,经病理学筛查)
组织来源:肺动脉中膜层显微分离
生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被)
细胞形态:典型长梭形,平行排列生长,汇合后呈"峰谷"状
细胞代数:P3 - P6(维持收缩表型及钙离子通道活性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1.5mL冻存管(专用无血清冻存体系)
培养基:Smooth Muscle Cell Medium(含5% FBS+PDGF - BB生长因子)
培养条件:恒温37℃,5% CO₂恒湿培养箱,培养基每48小时更换
冻存条件:程序降温冻存液(含7% DMSO及海藻糖),液氮气相长期保存
倍增时间:约36 - 60小时(与传代密度及血清批次相关)
供应限制:仅用于体外研究,禁止体内移植或基因治疗
二、细胞培养操作指南
收货处理:
・冻存管复苏需37℃水浴震荡解冻,预包被培养皿接种
・贴壁细胞运输瓶需静置4小时后首次换液
传代标准:融合度达80% - 85%(密度过高易发生表型转化)
传代比例:1:2至1:4(建议接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
・采用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
・37℃消化3 - 5分钟,终止时加入含血清培养基
注意事项:
・机械吹打力度需轻柔(保护细胞骨架完整性)
・传代后需静置6小时再移动培养器皿
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无蛋白冻存体系(含双低温保护剂)
细胞密度:冻存浓度2×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
・离心后分装于冻存管,严格记录细胞代次
・程序降温:室温→4℃(30min)→ - 80℃(24h)→液氮转移
复苏验证:
・复苏后12小时检测贴壁率(应≥85%)
・功能验证:钙离子荧光探针检测(P4代细胞需保持电压门控通道活性)
四、售后服务承诺
重发标准:
1.物流温度记录仪显示超温≥10分钟(需提供原始数据)
2.到货72小时内经ELISA检测证实交叉污染
3.原代标志物(α - SMA)免疫荧光检测阴性
4.细胞增殖曲线异常(与标准数据偏差>20%)
不予重发情形:
1.未使用推荐浓度丝裂霉素C处理
2.自行更改培养基血清浓度导致表型改变
3.未进行细胞周期同步化直接用于收缩实验
4.超过建议代次继续传代导致的性能衰退