一、细胞基本属性
- 细胞名称：Walker/LLC - WRC 256大鼠腹水癌细胞
- 细胞别称：Walker 256细胞；LLC - WRC 256细胞；大鼠腹水癌细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 组织来源：大鼠乳腺癌诱导的腹水癌模型
- 生长特性：悬浮生长（部分贴壁倾向，依赖细胞密度）
- 细胞形态：不规则圆形或卵圆形，胞质透亮，核质比高
- 细胞代数：P5 - P15（建议使用传代中期细胞以保证实验稳定性）
- 细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含含血清冻存液）
- 培养基：RPMI - 1640基础培养基（含10% FBS+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：含血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂）， - 150℃以下长期保存
- 倍增时间：约24 - 36小时（依赖接种密度与培养基条件）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物开发
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：直接转移至培养箱静置2小时，待细胞自然沉降。
- 传代标准：悬浮细胞密度达1×10^6 cells/mL或贴壁细胞融合度达80% - 90%。
- 传代比例：悬浮细胞按1:3稀释；贴壁细胞按1:2至1:3传代。
- 消化方法（贴壁状态）：使用0.25% Trypsin - EDTA消化1 - 2分钟，离心后重悬于新鲜培养基。
- 注意事项：避免频繁离心导致细胞机械损伤；贴壁细胞需定期检查基质附着状态；悬浮培养时需保持适当摇速（建议120 rpm）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：含血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+基础培养基）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
- 冻存步骤：离心收集细胞，重悬于冻存液后分装至冻存管，立即进行梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存。
- 复苏验证：复苏后存活率≥85%（台盼蓝染色法）；功能验证：体外侵袭实验（Matrigel模型）或动物模型成瘤性检测
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 细胞运输过程中温度异常（需提供物流温度记录证明）；
- 到货3天内经检测证实支原体污染（需提供第三方检测报告）；
- 复苏后存活率低于80%；
- 细胞种属鉴定与描述不符。
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行冻存或复苏操作；
- 使用非指定培养基导致细胞表型改变；
- 超过建议传代次数导致的性能退化；
- 未在无菌条件下操作引发的污染问题
