一、细胞基本属性
- 细胞名称：PC12未分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
- 细胞别称：PC12细胞；大鼠嗜铬细胞瘤细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 组织来源：肾上腺髓质嗜铬细胞
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或聚赖氨酸包被培养器皿）
- 细胞形态：未分化状态下呈圆形或短梭形，聚集成簇生长
- 细胞代数：建议使用P3 - P10代（维持未分化表型及功能稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：RPMI 1640培养基（含10%马血清+5%胎牛血清+1%双抗）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 倍增时间：约48 - 72小时（依赖培养密度与包被基质）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外表面，直接置于37℃培养箱平衡
- 传代标准：细胞密度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
- 消化方法
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落
- 注意事项
- 传代后6小时内避免移动培养瓶（促进贴壁）
- 定期检测NGF敏感性（未分化细胞应无神经突延伸）
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%胎牛血清）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮储存
- 复苏验证
- 存活率≥85%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：NGF诱导分化实验（100ng/mL处理3天应出现神经突）
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 物流温度记录异常导致细胞失活（需提供温度监测截图）
- 到货72小时内证实微生物污染（需提供污染检测证据）
- 细胞存活率低于80%（台盼蓝染色定量报告）
- 物种鉴定结果与大鼠STR不匹配
- 不予重发情形
- 未按要求使用胶原包被培养器皿
- 擅自添加神经生长因子（NGF）改变细胞状态
- 培养环境温度或CO₂浓度长期偏离设定值
- 未在P10代前完成实验或冻存备份
