一、细胞基本属性
细胞名称
RIN-m5f大鼠β胰岛素瘤细胞
细胞别称
RINm5F细胞；大鼠胰岛素瘤细胞；胰岛β细胞系
种属来源
大鼠（Rattus norvegicus）
组织来源
胰岛β细胞瘤组织
生长特性
贴壁生长（部分批次可见半悬浮状态）
细胞形态
不规则多边形或梭形，细胞间连接紧密
细胞代数
P5 - P15（推荐使用代数以保证胰岛素分泌稳定性）
细胞规格
1×10^6 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含专用冻存液）
培养基
RPMI - 1640培养基（含10%胎牛血清+1%青霉素 - 链霉素）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及葡萄糖保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间
~24 - 48小时（与血清批次及葡萄糖浓度相关）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或活体移植实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
培养瓶：75%酒精表面消毒后直接置于培养箱静置4小时
传代标准
细胞融合度达80% - 90%（高密度易触发分化）
传代比例
1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液
37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项
避免频繁观察扰动细胞贴壁（影响胰岛素分泌功能）
传代后需补充11.1mmol/L葡萄糖以维持代谢活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
专用无血清冻存液（含10% DMSO+5%葡萄糖）
细胞密度
冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤
消化离心后缓慢逐滴加入冻存液混匀
程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证
复苏后48小时内进行台盼蓝染色（存活率≥85%）
功能验证：葡萄糖刺激胰岛素释放实验（P8代细胞需保持分泌响应性）
四、售后服务承诺
重发标准
1.运输温度记录异常导致细胞团块溶解（需提供温度监测截图）
2.到货7日内证实微生物污染（需提供无菌检测报告）
3.胰岛素基础分泌量低于1.5ng/10^6 cells/小时（ELISA验证）
不予重发情形
1.未按规范补充高浓度葡萄糖培养基
2.使用非胰蛋白酶消化导致细胞膜损伤
3.未定期进行支原体检测引发交叉污染
4.超过推荐代数（P15）后出现功能衰减
