一、细胞基本属性
1. 细胞名称:PC12低分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
2. 细胞别称:PC12细胞;大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;嗜铬细胞瘤细胞系
3. 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
4. 年龄性别:成年雌性大鼠(NGF敏感株系,来源明确)
5. 组织来源:肾上腺髓质嗜铬细胞(未分化表型)
6. 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
7. 细胞形态:小圆形或多角形,聚集生长,低分化状态下胞质颗粒少
8. 细胞代数:P5 - P15(推荐使用代数,保持未分化特性)
9. 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
10. 培养基:RPMI 1640培养基(含5%马血清+10%胎牛血清+1%双抗)
11. 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
12. 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
13. 倍增时间:约24 - 48小时(依赖血清浓度及培养密度)
14. 供应限制:仅限体外科研使用,不可用于活体实验或临床
二、细胞培养操作指南
1. 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:表面消毒后静置培养箱4小时再换液
2. 传代标准:细胞密度达80% - 90%(避免过度融合诱导分化)
3. 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
4. 消化方法
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
5. 注意事项
- 传代后需胶原包被培养皿(维持未分化状态)
- 避免频繁换液(血清浓度变化可能诱导分化)
三、细胞冻存操作规范
1. 冻存液配方:基础培养基:血清:DMSO = 7:2:1(含抗氧化剂)
2. 细胞密度:冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
3. 冻存步骤
- 离心后重悬于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃ 12h → 液氮储存
4. 复苏验证
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥85%)
- 功能验证:神经生长因子(NGF)响应性检测(低分化细胞应无轴突延伸)
四、售后服务承诺
1. 重发标准
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供冷链记录)
- 7日内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 细胞活力低于85%(需提供染色结果)
- 种属鉴定与大鼠不符(PCR检测结果)
2. 不予重发情形
- 使用非胶原包被培养器皿导致分化
- 未按推荐添加NGF进行分化实验
- 血清批次更换未做适应性培养
- 超过建议代数仍要求功能一致性