PC12低分化+GFP大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞低分化+GFP

大鼠细胞系

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XM-X01271×10^6大鼠细胞系3000


 一、细胞基本属性

细胞名称

PC12低分化+GFP大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞


细胞别称

PC12 - GFP细胞;大鼠嗜铬细胞瘤细胞;GFP标记低分化PC12细胞


种属来源

大鼠(Rattus norvegicus)


组织来源

肾上腺嗜铬细胞瘤组织


生长特性

贴壁生长(需基质包被培养器皿)


细胞形态

低分化状态下呈圆形或短梭形,GFP荧光标记均匀表达


细胞代数

P3 - P10(建议使用P5 - P8代以保证荧光稳定性与功能特性)


细胞规格

1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)


培养基

RPMI 1640培养基(含10%马血清+5% FBS+1%青霉素/链霉素+2mM L - 谷氨酰胺)


培养条件

气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%


冻存条件

无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂), - 150℃以下长期保存


荧光特性

稳定表达绿色荧光蛋白(Ex/Em = 488nm/507nm),传代后需避光保存


供应限制

仅限科研用途,不可用于临床或体内实验


 二、细胞培养操作指南

收货处理

• 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基

• 培养瓶:75%酒精擦拭表面,静置培养箱平衡1小时


传代标准

细胞密度达80% - 90%融合(通常每2 - 3天传代一次)


传代比例

1:3至1:6(建议接种密度1×10^4 cells/cm²)


消化方法

• 使用0.25% Trypsin - EDTA(含1mM EDTA)

• 37℃消化3 - 5分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落


注意事项

• 避免频繁观察荧光以防光漂白(观察时关闭培养箱光源)

• 传代后48小时内需更换培养基以维持GFP表达稳定性

• 建议使用胶原蛋白包被培养皿增强贴附性


 三、细胞冻存操作规范

冻存液配方

基础培养基+20% FBS+10% DMSO


细胞密度

冻存浓度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL


冻存步骤

• 消化后离心收集细胞,重悬于预冷冻存液

• 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期保存


复苏验证

• 复苏后48小时检测GFP荧光强度(流式细胞术阳性率≥98%)

• 功能验证:神经生长因子(NGF)诱导分化实验(低分化特性验证)


 四、售后服务承诺

重发标准

1. 运输过程干冰耗尽导致细胞死亡(需提供温度记录证明)

2. 到货7日内检出支原体污染(需提供第三方检测报告)

3. GFP表达率低于90%(流式细胞术检测)

4. 细胞STR鉴定与大鼠种属不符


不予重发情形

1. 使用非推荐包被基质导致细胞贴壁失败

2. 长期暴露于荧光显微镜光源引发光毒性损伤

3. 未按规范添加NGF导致自发分化

4. 超代次使用(P10以上)引发的功能异常