一、细胞基本属性
细胞名称
RLE-6TN大鼠肺泡II型上皮细胞
细胞别称
RLE-6TN细胞;肺泡II型上皮细胞;肺泡上皮细胞
种属来源
大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别
健康成年大鼠(性别不限,供体无肺部疾病史)
组织来源
肺组织肺泡区段
生长特性
贴壁生长(依赖细胞外基质及生长因子)
细胞形态
典型上皮样单层,贴壁后呈扁平多角形
细胞代数
P3 - P8(确保功能稳定性及实验一致性)
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基
DMEM/F12培养基(含10% FBS+上皮细胞生长添加剂)
培养条件
气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件
无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间
约48 - 72小时(与培养密度及培养基状态相关)
供应限制
仅限科研使用,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基轻柔混匀后离心重悬。
培养瓶:75%酒精表面消毒,静置于培养箱内平衡1小时后观察贴壁状态。
传代标准
细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)。
传代比例
1:2至1:3(推荐接种密度为4×10³ cells/cm²)。
消化方法
使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化2 - 3分钟,显微镜下确认细胞边缘收缩后立即终止。
注意事项
避免消化时间过长导致细胞膜损伤,传代后12小时内更换培养基以去除残留酶类。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂)。
细胞密度
冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
冻存步骤
离心收集细胞后重悬于冻存液,分装至冻存管。梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
复苏验证
复苏后24小时内台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%),并通过碱性磷酸酶活性检测验证细胞功能。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程中温度异常导致细胞失活(需提供温度记录证明)。
2. 收到后72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)。
3. 复苏存活率低于承诺标准(需提供台盼蓝染色结果)。
4. 物种鉴定或标志物检测与描述不符。
不予重发情形
1. 未按操作指南进行复苏或培养导致细胞状态异常。
2. 使用非推荐培养基或添加剂影响细胞功能。
3. 未及时传代导致细胞过度老化或死亡。
4. 未进行规范检测即开展后续实验。