一、细胞基本属性
细胞名称:PC12高分化大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞
细胞别称:PC12细胞;大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;嗜铬细胞瘤高分化细胞系
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:雄性SD大鼠肾上腺髓质组织来源
组织来源:肾上腺髓质嗜铬细胞
生长特性:贴壁生长(神经生长因子依赖性)
细胞形态:高分化后呈多角形或梭形,表面有神经突触样结构
细胞代数:P5 - P10(维持神经内分泌功能稳定性)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:RPMI 1640培养基(含5%马血清+10%胎牛血清+50ng/mL神经生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:~48 - 72小时(神经生长因子诱导后增殖减缓)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后加入预热培养基重悬;培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡2小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(高分化状态下建议减少传代频率)
传代比例:1:2至1:3(神经突触较长时需轻柔吹打)
消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,终止后离心保留神经突触结构
注意事项:避免频繁传代导致去分化(建议每代维持7 - 10天);分化阶段需维持神经生长因子浓度(不低于30ng/mL)
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL(含完整神经突触结构)
冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液;程序降温:4℃ 30分钟 → -80℃ 24小时 → 液氮长期保存
复苏验证:复苏后48小时检测酪氨酸羟化酶活性(Western Blot验证);功能检测:儿茶酚胺分泌能力测试(HPLC法测定多巴胺水平)
四、售后服务承诺
重发标准:1.干冰运输期间温度记录异常(需提供物流温度监控截图);2.到货7日内检测到支原体污染(需提供第三方检测报告);3.细胞贴壁率低于80%(需提供接种后24小时显微照片);4.未检测到神经生长因子响应(需提供NGF刺激实验记录)
不予重发情形:1.自行撤除神经生长因子导致细胞去分化;2.使用非配套培养基超过48小时;3.未按规范进行梯度离心损伤细胞结构;4.未执行推荐的分化维持培养方案
注:本产品需配合神经生长因子使用,实验前需阅读《PC12高分化细胞专用培养指南》