一、细胞基本属性
细胞名称:RH - 35大鼠肝癌细胞(Rat Hepatoma Cell Line RH - 35)
细胞别称:RH - 35细胞;大鼠肝癌细胞系
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
组织来源:化学诱导的大鼠肝癌组织
生长特性:贴壁生长,侵袭性增殖
细胞形态:不规则多边形或梭形,核质比高,成簇分布
细胞代数:P5 - P15(建议使用代数内保证表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10%胎牛血清+1%双抗)
培养条件:气相为5% CO₂,温度37℃,湿度95%
冻存条件:含10% DMSO的胎牛血清冻存液,液氮长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(与血清浓度及接种密度相关)
供应限制:仅用于肿瘤机制研究或药物筛选,禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管接收后立即37℃水浴解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶酒精消毒后静置培养箱4小时,待细胞贴壁后换液
传代标准:融合度达90% - 95%(快速增殖阶段建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:5(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA消化液
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 终止消化时需加入等体积含血清培养基
- 传代后6小时内避免移动培养器皿以防悬浮
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:90%胎牛血清+10% DMSO
冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存程序:
- 消化后细胞离心去上清,缓慢滴加冻存液重悬
- 分装后程序降温:4℃预冷30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期存储
质检标准:
- 复苏存活率≥85%(台盼蓝染色法)
- 功能验证:CCK - 8检测24小时增殖活性(P8代细胞应保持对数生长期特性)
四、售后服务承诺
重发保障:
1. 物流温度异常导致细胞失活(需提交冷链记录截图)
2. 到货48小时内经PCR证实微生物污染
3. 细胞STR位点与大鼠基因组不符
4. 复苏后贴壁率低于50%(需提供相差显微镜图像)
免责条款:
1. 客户未按说明书进行预培养基质包被
2. 使用低于5%血清培养基导致生长停滞
3. 解冻后离心转速超过300g造成机械损伤
4. 未定期进行核型分析导致的实验偏差
(注:所有操作需符合生物安全Ⅱ级实验室规范,传代10代后建议重新鉴定致瘤性标记物)