一、细胞基本属性
细胞名称
NR8383大鼠肺泡巨噬细胞
细胞别称
大鼠肺泡巨噬细胞；NR8383细胞；肺巨噬细胞系
种属来源
大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别
健康成年大鼠（性别不限，供体筛选无肺部感染史）
组织来源
肺泡灌洗液或肺组织分离纯化
生长特性
贴壁或半贴壁生长（部分细胞悬浮，需轻柔处理）
细胞形态
不规则圆形或椭圆形，边缘伪足状突起，活化后体积增大
细胞代数
推荐使用P3 - P8代（维持吞噬功能与细胞因子分泌活性）
细胞规格
1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基
DMEM/F12（含15% FBS+1%青霉素/链霉素+10mM HEPES缓冲液）
培养条件
气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件
无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
倍增时间
约48 - 72小时（与激活状态及培养条件相关）
供应限制
仅限科研用途，不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理
冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去除冻存液后重悬于预热培养基；培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于培养箱，静置4小时后观察贴壁情况。
传代标准
贴壁细胞融合度达80% - 90%（悬浮细胞密度达1×10^6 cells/mL时传代）。
传代比例
贴壁细胞1:2至1:3，悬浮细胞按密度稀释至2×10^5 cells/mL。
消化方法
贴壁细胞使用0.25%胰酶 - EDTA，37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁促使脱落；悬浮细胞直接离心收集。
注意事项
避免剧烈吹打损伤细胞膜；传代后24小时内勿更换培养基以维持细胞活性。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方
无血清冻存液（含10% DMSO+20% FBS+1%葡萄糖）。
细胞密度
贴壁细胞1×10^6 cells/mL，悬浮细胞2×10^6 cells/mL。
冻存步骤
离心收集细胞，重悬于预冷冻存液；程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
复苏验证
存活率≥90%（台盼蓝染色法）；功能验证：LPS刺激后TNF - α分泌量检测（P5代细胞应≥500 pg/mL）。
四、售后服务承诺
重发标准
1. 运输过程温度记录异常（需提供物流温度监控证明）；
2. 到货72小时内经PCR证实支原体污染；
3. 细胞复苏存活率低于90%（需提供染色图片及操作视频）；
4. 物种鉴定结果与描述不符。
不予重发情形
1. 使用含β - 巯基乙醇的培养基导致细胞毒性；
2. 未按规范进行贴壁/悬浮双模式培养；
3. 擅自添加分化诱导剂改变细胞特性；
4. 超过推荐代数（P8）后出现的功能衰退。
