一、细胞基本属性
细胞名称:L6大鼠成肌细胞(Rat Skeletal Myoblasts)
细胞别称:L6细胞;大鼠骨骼肌成肌细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别不限,供体无肌肉病变史)
组织来源:骨骼肌组织
生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白或明胶包被培养器皿)
细胞形态:未分化时呈长梭形,分化后可形成多核肌管
细胞代数:P3 - P8(推荐使用低代次以保证分化潜能)
细胞规格:5×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:高糖DMEM(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约24 - 48小时(与血清浓度及分化状态相关)
供应限制:仅限科学研究,不可用于临床或活体动物移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基离心后重悬;
培养瓶:酒精消毒表面,静置于CO₂培养箱4小时再换液。
传代标准:细胞融合度达70% - 80%(高密度可能自发启动分化)
传代比例:1:3至1:6(建议接种密度2×10⁴ cells/cm²)
消化方法:
使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA(含钙离子);
室温消化1 - 3分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落。
注意事项:
分化诱导时需更换为低血清培养基(2% HS);
避免频繁传代导致分化能力下降。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+90% FBS)
细胞密度:1×10⁶ - 5×10⁶ cells/mL(分化前单细胞状态最佳)
冻存步骤:
离心去除胰酶后缓慢加入预冷冻存液;
程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
复苏验证:
复苏存活率≥85%(台盼蓝染色检测);
功能验证:肌管形成实验(分化7天后可见多核融合)。
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);
2. 72小时内证实支原体污染(需第三方检测报告);
3. 细胞形态异常或丧失分化能力(需提供培养记录);
4. 种属鉴定结果不符(STR分析验证)。
不予重发情形:
1. 未使用推荐包被基质导致贴壁失败;
2. 自行修改培养基配方影响细胞特性;
3. 未按规定进行定期支原体检测;
4. 超过建议代数仍继续传代使用。
(注:本产品需配合分化培养基使用可完成肌管形成,具体实验方案可提供技术文档支持。)