一、细胞基本属性
- 细胞名称:IEC - 6大鼠小肠隐窝上皮细胞
- 细胞别称:IEC - 6细胞;小肠隐窝上皮细胞;肠道隐窝细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:健康幼鼠(性别不限,供体筛选无肠道疾病史)
- 组织来源:小肠隐窝段
- 生长特性:贴壁生长(依赖胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:不规则多边形或铺路石样单层,接触抑制后排列紧密
- 细胞代数:P3 - P10(推荐使用代数内维持增殖活性)
- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含5% FBS + 10μg/mL胰岛素+1%非必需氨基酸)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖血清批次与培养条件)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精擦拭后静置培养箱平衡1小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(通常每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度3×10³ cells/cm²)
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.02% EDTA),37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞间隙增大后终止
- 注意事项:避免机械吹打过度(防止微绒毛结构损伤);传代后6小时内不宜移动培养瓶确保贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO + 20% FBS)
- 细胞密度:冻存浓度:5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤:离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液,梯度降温:4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
- 复苏验证:复苏后12小时检测贴壁率(应≥85%);功能验证:CCK - 8法检测P8代细胞增殖曲线应符合标准
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 1.干冰运输全程温度记录异常(需提供物流温度监控截图)
- 2.到货48小时内证实真菌/黑胶虫污染(需提供显微镜图像)
- 3.细胞贴壁率低于80%(需提供接种后12小时观察记录)
- 4.物种鉴定结果与标注不符
- 不予重发情形
- 1.未使用胶原包被培养器皿导致贴壁失败
- 2.自行更换培养基成分引发形态异常
- 3.消化时间超过5分钟造成单细胞率过低
- 4.未按要求进行定期支原体预防处理