一、细胞基本属性
- 细胞名称:HSC - T6永生型大鼠肝储脂细胞
- 细胞别称:肝星状细胞;HSC - T6细胞系;大鼠肝储脂细胞
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 细胞类型:肝脏星状细胞(经永生化处理)
- 组织来源:健康成年大鼠肝脏组织
- 生长特性:贴壁生长(需胶原包被培养器皿)
- 细胞形态:活化后呈纺锤形或星状,胞质富含脂滴
- 细胞代数:P5 - P15(建议使用前10代以保证表型稳定)
- 细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 36小时(依赖活化状态与培养条件)
- 应用范围:肝纤维化机制研究、药物筛选、细胞外基质代谢分析
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管需37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶经酒精擦拭后静置培养箱平衡1小时。
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(活化状态避免过度增殖)。
- 传代比例:1:2至1:3(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法:使用0.25%胰酶 - EDTA(含0.1%胶原酶),37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁至细胞脱落,立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项
- 培养器皿需预包被Ⅰ型胶原(浓度≥5μg/cm²)以维持细胞粘附。
- 避免频繁传代导致表型漂移(活化状态不可逆)。
- 定期检测脂滴含量(油红O染色)评估细胞状态。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO+10% FBS)。
- 冻存密度:5×10^6 - 1×10^7 cells/mL。
- 冻存步骤
- 离心收集细胞,重悬于冻存液分装至冻存管。
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期保存。
- 复苏验证
- 复苏后存活率≥90%(台盼蓝染色法)。
- 功能验证:α - SMA免疫荧光检测(P8代细胞活化标志物表达应稳定)。
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程温度异常导致细胞死亡(需提供冻存管状态照片)。
- 到货72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测证据)。
- 细胞复苏存活率低于85%。
- 种属鉴定结果与大鼠不符(STR检测报告)。
- 不予重发情形
- 未使用胶原包被培养器皿导致细胞贴壁失败。
- 使用非推荐培养基或血清批次。
- 未按规范进行细胞活化状态检测。
- 解冻后存放超过48小时未进行培养。