一、细胞基本属性
- 细胞名称 :H9C2大鼠心肌细胞(H9C2 Rat Myocardial Cells)
- 细胞别称 :H9C2细胞;大鼠心肌细胞系;心肌母细胞
- 种属来源 :大鼠(Rattus norvegicus)
- 组织来源 :胚胎大鼠心脏组织
- 生长特性 :贴壁生长(依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿)
- 细胞形态 :梭形至多角形,可呈现心肌细胞样融合特征
- 细胞代数 :P5 - P15(推荐使用代数以保证分化潜能稳定性)
- 细胞规格 :1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基 :高糖DMEM培养基(含10% FBS+1%双抗)
- 培养条件 :气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件 :无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间 :约24 - 48小时(受血清浓度及细胞密度影响)
- 供应限制 :仅限科研用途,不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理 :冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精擦拭表面后直接置于培养箱平衡。
- 传代标准 :细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)。
- 传代比例 :1:3至1:4(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)。
- 消化方法 :使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA),37℃消化1 - 2分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止。
- 注意事项 :避免消化过度(影响细胞膜完整性);传代后6 - 8小时更换培养基以去除死细胞碎片。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方 :无血清冻存液(含10% DMSO及渗透保护剂)。
- 细胞密度 :冻存浓度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL。
- 冻存步骤 :离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液,梯度降温程序:4℃ 30分钟 → -20℃ 2小时 → -80℃过夜 → 液氮长期保存。
- 复苏验证 :复苏后24小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%);功能验证:心肌细胞标志物α - actinin免疫荧光染色(P8代细胞应维持心肌特异性表达)。
四、售后服务承诺
- 重发标准 :
- 运输温度异常导致细胞死亡(需提供物流温度记录);
- 72小时内证实微生物污染(需提供污染检测报告);
- 细胞复苏存活率低于85%;
- 物种鉴定结果与描述不符。
- 不予重发情形 :
- 收货后超72小时未复苏;
- 使用非推荐培养基或未包被培养器皿;
- 实验操作不当导致分化异常(如未控血清浓度);
- 未定期检测支原体导致交叉污染。