一、细胞基本属性
细胞名称:DI TNC1大鼠脑间质细胞
细胞别称:脑间质细胞;脑间质祖细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
年龄性别:健康成年大鼠(性别随机,供体经病理学筛查无神经系统疾病史)
组织来源:脑组织间质区域
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质支持)
细胞形态:不规则纺锤形或星形,具备典型间质细胞特征
细胞代数:P4 - P10(推荐使用代数以维持功能稳定性)
细胞规格:1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用无血清冻存液)
培养基:DMEM/F12基础培养基(含10% FBS+1%双抗+神经生长因子补充剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度及营养状态相关)
供应限制:仅供体外研究使用,不可用于临床或活体实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预温培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始接种密度为3×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含0.02% Ca²⁺)
- 37℃消化2 - 3分钟,显微镜下观察细胞边缘卷曲后终止反应
注意事项:
- 消化终止需加入等体积含血清培养基中和
- 传代后48小时内避免频繁移动培养器皿以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:1×10⁶ - 1.5×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后弃上清,轻柔重悬细胞于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 12小时→转移至液氮
复苏验证:
- 复苏后48小时检测细胞存活率(台盼蓝染色法需≥90%)
- 功能验证:GFAP免疫荧光染色确认间质细胞特性
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输过程液氮罐异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 到货7天内证实微生物污染(需提供第三方检测报告)
3. 复苏存活率低于85%(按规范操作前提下)
4. 种属鉴定结果与描述不符
不予重发情形:
1. 未按说明书要求进行预培养步骤
2. 使用非推荐培养基或添加未经验证因子
3. 多次冻融操作导致细胞损伤
4. 未定期进行支原体检测造成实验污染
(注:以上内容基于标准操作流程编写,具体实验条件需根据研究目的优化调整)