一、细胞基本属性
细胞名称:C6大鼠脑胶质瘤细胞(Rat C6 Glioma Cells)
细胞别称:C6胶质瘤细胞;大鼠神经胶质瘤细胞
种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
组织来源:脑胶质瘤组织(化学诱导模型来源)
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质黏附)
细胞形态:不规则梭形或星形,部分呈簇状聚集
细胞代数:P3 - P10(建议使用前10代以保证表型稳定性)
细胞规格:1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO+细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间:约24 - 36小时(依赖传代密度与培养基批次)
供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶:酒精消毒表面,直接置于37℃培养箱静置4小时
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液(含酚红指示)
- 37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项:
- 避免消化过度(胶质瘤细胞易成团聚集)
- 传代后12小时观察贴壁情况,及时补充新鲜培养基
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+20% FBS)
细胞密度:冻存浓度5×10^6 - 1×10^7 cells/mL
冻存步骤:
- 离心收集细胞后缓慢加入冻存液混匀
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后48小时检测存活率(台盼蓝染色≥90%)
- 功能验证:细胞增殖能力检测(CCK - 8法评估P5代生长曲线)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录)
2. 72小时内证实细菌/真菌污染(需提供污染检测影像)
3. 细胞复苏存活率低于85%(需提供台盼蓝染色结果)
4. STR基因分型与数据库不匹配
不予重发情形:
1. 未按规范进行传代导致细胞老化
2. 使用非标准培养基或血清批次
3. 实验操作污染未及时反馈
4. 液氮保存设备故障导致细胞失活
(注:所有操作需符合生物安全二级实验室规范,建议定期进行支原体检测)