一、细胞基本属性
细胞名称：BRL大鼠肝细胞（Buffalo Rat Liver Cells）
细胞别称：BRL - 3A细胞；大鼠肝细胞系；肝实质细胞
种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
年龄性别：健康新生大鼠（性别不限，供体筛选无肝脏病变史）
组织来源：肝脏组织实质细胞
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被培养器皿）
细胞形态：典型上皮样单层，接触抑制后呈不规则多边形
细胞代数：P3 - P10（确保代谢活性与功能稳定性）
细胞规格：5×10^5 cells/T25培养瓶或1.5mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%非必需氨基酸 + 1%丙酮酸钠）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约24 - 48小时（依赖培养密度与传代频率）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或药物生产。
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基混匀离心，弃上清后重悬接种。
- 培养瓶：75%酒精擦拭表面，置于CO₂培养箱静置4小时以恢复代谢。
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（通常每2 - 3天传代一次）。
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）。
消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.02%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，镜下观察细胞间隙扩大后轻柔拍打瓶壁终止消化。
注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞膜完整性受损）。
- 首次传代前需更换培养基以去除冻存保护剂残留。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 20% FBS + 渗透调节剂）。
细胞密度：冻存浓度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL。
冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液。
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 80℃ 24小时→液氮长期储存。
复苏验证：
- 复苏后48小时内完成台盼蓝染色检测存活率（标准≥90%）。
- 功能验证：P5代细胞需通过白蛋白分泌检测验证肝功能活性。
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控截图）。
2. 到货7天内证实真菌/支原体污染（需提供第三方检测报告）。
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%（需提供明场显微照片）。
4. 物种鉴定结果与描述不符（需提供STR对比数据）。
不予重发情形：
1. 客户未按推荐胶原包被导致细胞贴壁失败。
2. 使用含β - 巯基乙醇的培养基引发细胞毒性。
3. 未定期检测交叉污染导致样本混杂。
4. 液氮储存罐故障未及时转移造成的细胞损失。
