一、细胞基本属性
- 细胞名称:A7r5大鼠胸大动脉平滑肌细胞
- 细胞别称:A7r5细胞;大鼠胸主动脉平滑肌细胞;胸大动脉SMC
- 种属来源:大鼠(Rattus norvegicus)
- 年龄性别:胚胎来源(具体供体信息不详)
- 组织来源:胸大动脉中层平滑肌组织
- 生长特性:贴壁生长(依赖贴壁基质)
- 细胞形态:长梭形或纺锤形,呈束状排列
- 细胞代数:建议使用P5 - P15代(维持功能稳定性)
- 细胞规格:1×10⁶ cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
- 培养基:DMEM高糖培养基(含10% FBS+2mM L - 谷氨酰胺)
- 培养条件:气相:5% CO₂+95%空气;温度:37℃;湿度:95%
- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
- 倍增时间:约24 - 48小时(依据培养条件及传代密度)
- 供应限制:仅限科研用途,不可用于临床或动物实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加入5mL预热培养基混匀离心后重悬接种
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后置于培养箱平衡2小时
- 传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代一次)
- 传代比例:1:3至1:6(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
- 消化方法
- 使用试剂:0.25% Trypsin - EDTA(含0.02% EDTA)
- 操作流程:37℃消化2 - 3分钟,轻拍培养瓶促使细胞脱落
- 注意事项
- 消化终止时需加入含血清培养基中和胰酶活性
- 传代后12 - 24小时更换培养基以促进贴壁
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及营养保护剂)
- 细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤
- 消化收集细胞,离心后重悬于冻存液
- 程序降温:4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃ 12小时→液氮长期保存
- 复苏验证
- 复苏后24小时台盼蓝染色检测存活率(≥90%)
- 功能验证:α - 平滑肌肌动蛋白(α - SMA)免疫荧光鉴定(P8代细胞阳性率>95%)
四、售后服务承诺
- 重发标准
- 运输过程中温度记录异常导致细胞失活(需提供物流温度曲线)
- 到货72小时内证实微生物污染(需提供检测报告)
- 复苏后细胞存活率低于85%(经第三方检测确认)
- STR鉴定与物种信息不符
- 不予重发情形
- 收货后未及时复苏超过48小时
- 使用非指定培养基导致细胞形态异常
- 自行修改冻存程序造成细胞损伤
- 未按要求进行定期支原体检测