一、细胞基本属性
细胞名称 : 9L/lacZ大鼠胶质肉瘤细胞
细胞别称 : 9L/lacZ胶质瘤细胞;9L - lacZ神经胶质瘤细胞
种属来源 : 大鼠(Rattus norvegicus)
模型背景 : 通过lacZ基因转染构建的胶质肉瘤细胞系,适用于肿瘤侵袭与基因治疗研究
组织来源 : 胶质肉瘤组织(经基因工程改造表达β - 半乳糖苷酶标记)
生长特性 : 贴壁生长(可形成致密单层或局部重叠)
细胞形态 : 不规则梭形或多角形,核质比高,边缘可见伪足样突起
细胞代数 : P5 - P15(经STR鉴定保证遗传稳定性)
细胞规格 : 1×10⁶ cells/T75培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基 : DMEM高糖培养基(含10% FBS+1%双抗+400μg/mL G418维持筛选)
培养条件 : 气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件 : 无血清冻存液(含8% DMSO及细胞保护剂),-150℃以下长期保存
倍增时间 : 约24 - 48小时(依赖血清浓度与传代密度)
供应限制 : 仅限体外科研使用,禁止用于活体实验或临床用途
二、细胞培养操作指南
收货处理 : 冻存管:37℃水浴快速解冻,离心去除冻存液后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精擦拭外表面,静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液
传代标准 : 细胞融合度达90% - 95%(建议每2 - 3天传代一次)
传代比例 : 1:3至1:5(推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²)
消化方法 : 使用0.25% Trypsin - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,轻拍瓶壁促使细胞脱落
注意事项 : G418需每代添加以维持lacZ基因表达;避免细胞过度融合导致分化或自发凋亡
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方 : 基础培养基+20% FBS+8% DMSO
细胞密度 : 冻存浓度:5×10⁶ - 1×10⁷ cells/mL
冻存步骤 : 消化离心后重悬于预冷冻存液;程序降温:4℃ 30min → -80℃ 24h → 转入液氮
复苏验证 : 复苏后48小时X - gal染色验证β - 半乳糖苷酶活性;连续培养三代检测G418抗性稳定性
四、售后服务承诺
重发标准 : 1.细胞复苏后经X - gal染色显示lacZ标记丢失;2.到货后72小时内经qPCR检测支原体阳性;3.STR图谱与数据库记录不符(需提供完整检测报告)
不予重发情形 : 1.未按规范维持G418筛选压力导致基因沉默;2.使用非推荐传代方法引起细胞分化;3.培养环境温度或CO₂浓度长期异常;4.未定期进行STR鉴定导致细胞交叉污染