还原型谷胱甘肽(GSH)含量试剂盒

一、产品简介

还原型谷胱甘肽（GSH）是一种在细胞内广泛存在的三肽，由谷氨酸、半胱氨酸及甘氨酸组成，化学名称为N-(N-L-γ-谷氨酰基-L-半胱氨酰基)甘氨酸，分子式为C10H17N3O6S，分子量为307.33。它溶于水、稀醇、液氨和甲基甲酰胺，而不溶于醇、醚和丙酮。GSH是细胞内最主要的抗氧化巯基物质，在抗氧化、蛋白质巯基保护和氨基酸跨膜运输等生理过程中发挥着至关重要的作用。

1. 抗氧化作用

GSH能够直接与自由基和过氧化物反应，将其还原为无害物质，从而保护细胞免受氧化损伤。这一过程中，GSH会被氧化为氧化型谷胱甘肽（GSSG）。GSH与GSSG之间的转化是细胞内氧化还原平衡的重要组成部分。

2. 蛋白质巯基保护

GSH能够与蛋白质中的巯基（-SH）结合，形成稳定的二硫键，从而保护蛋白质免受氧化损伤。这一作用对于维持蛋白质的结构和功能至关重要。

3. 氨基酸跨膜运输

GSH还参与氨基酸的跨膜运输过程，有助于维持细胞内氨基酸的平衡。

4. GSH/GSSG比值的意义

GSH与GSSG的比值（GSH/GSSG）是细胞氧化还原状态的主要动态指标。当细胞处于氧化应激状态时，GSH会被大量消耗，导致GSH/GSSG比值下降。因此，测定细胞内GSH和GSSG含量以及GSH/GSSG比值，能够很好地反映细胞所处的氧化还原状态。

5. GSH与DTNB的反应

GSH与5,5'-二硫代-双-(2-硝基苯甲酸)（DTNB）反应生成复合物，在412nm处有特征吸收峰。这一反应被广泛用于GSH的定量测定。其吸光度与GSH含量成正比，因此可以通过测量吸光度来间接测定GSH的含量。

二、所需的仪器和用品

进行GSH含量测定实验时，需要以下仪器和用品：

1. 酶标仪

• 用途：用于测量GSH与DTNB反应生成的复合物在412nm处的吸光度。酶标仪具有高精度、高灵敏度的特点，能够准确测定样品的吸光度值。

• 注意事项：在使用前需要预热酶标仪，并调节波长到412nm，同时保持孔板洁净无异物遮盖。

2. 96孔板

• 用途：用于盛放待测样品溶液和试剂，便于高通量测定。96孔板具有多个小孔，可以同时进行多个样品的测定，提高实验效率。

• 注意事项：在使用前需要确保每个小孔都干净无污染，并且样品和试剂的加入量要准确。根据实验需求，可以选择无色透明、白色或黑色的96孔板。

3. 低温离心机

• 用途：用于分离样品中的固体和液体成分，提取GSH。低温条件有助于保持GSH的活性。

• 注意事项：在使用前需要设置好离心参数（如转速、时间等），并确保离心机已预冷至适当温度。

4. 水浴锅

• 用途：用于保持试剂或样品在特定温度下的稳定。在某些实验步骤中，需要将试剂或样品置于水浴锅中进行保温。

• 注意事项：在使用前需要设置好水浴锅的温度，并确保水浴锅内的水位足够。

5. 可调节移液器

• 用途：用于精确移取样品溶液和试剂。可调节移液器能够根据不同的实验需求调整移液量，确保实验的准确性和重复性。

• 注意事项：在使用可调节移液器时，需要确保其已进行校准，并且移液过程中要避免气泡和溅出。

6. 蒸馏水

• 用途：用于配制试剂和稀释样品溶液。蒸馏水的纯度高、无杂质，能够减少实验中的误差来源。

• 注意事项：在使用蒸馏水时，需要确保其干净无污染，并及时更换以保持其纯度。

XM-W-AS005 还原型谷胱甘肽含量（GSH）说明书-微板法-96样.docx

XM-W-AS005-48 还原型谷胱甘肽含量（GSH）说明书-微板法-48样.docx

XM-W-AS005-196 还原型谷胱甘肽含量（GSH）说明书-微板法-196样.docx

XM-F-AS005还原型谷胱甘肽含量（GSH）说明书-分光法-48样.docx