γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)/γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶(GCL)活性试剂盒

ASA-GSH盾环系列


货号

规格

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目录价

XM-F-AS01448样分光法517
XM-W-AS01496样微板法942


一、产品简介

γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS,EC 6.3.2.2)是谷胱甘肽(GSH)合成途径中的关键限速酶,具有极其重要的生理功能。以下是对该产品的详细扩充介绍:

  1. 定义与功能

    • 定义:γ-GCS是一种由重链和轻链构成的异二聚体酶,催化并调节谷胱甘肽的生物合成。

    • 功能:在ATP和镁离子的存在下,γ-GCS能够催化谷氨酸和半胱氨酸合成γ-谷氨酰半胱氨酸(γ-GC),这是GSH合成的前体物质。GSH是机体一种重要的抗氧化剂,在保持气道上皮细胞完整性、抵御肺部损伤与炎症、抗氧化损伤等方面起到至关重要的作用。

  2. 催化机制

    • γ-GCS通过其独特的催化机制,将谷氨酸和半胱氨酸连接成γ-GC。在这一过程中,ATP提供能量并去磷酸化产生无机磷分子。

    • 通过测定无机磷的增加速率,可以间接计算出γ-GCS的活性,从而评估其在GSH合成中的贡献。

  3. 生理意义

    • γ-GCS在细胞氧化应激过程中发挥着重要作用。当细胞面临氧化压力时,GSH的合成会加速,以应对氧化损伤。γ-GCS作为GSH合成的限速酶,其活性直接影响GSH的合成速率和细胞内GSH的浓度。

    • 研究表明,γ-GCS在肺脏等组织中具有较高的酶活性,这与肺脏在抵御氧化应激和炎症方面的功能密切相关。

  4. 应用前景

    • 由于γ-GCS在GSH合成中的关键作用,它成为研究氧化应激、炎症和抗氧化治疗等领域的重要靶点。

    • 通过调节γ-GCS的活性,可以影响GSH的合成和细胞内的氧化还原平衡,从而为相关疾病的治疗提供新的思路和方法。

二、所需的仪器和用品

进行γ-GCS活性测定实验时,需要以下仪器和用品:

  1. 酶标仪

    • 用途:用于测量无机磷在特定波长下的吸光度值,从而计算无机磷的增加速率和γ-GCS的活性。

    • 注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到适当的范围(如700nm)。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。

  2. 96孔板

    • 用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。96孔板具有多个小孔,可以同时处理多个样品,提高实验效率。

    • 注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。

  3. 离心机

    • 用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取γ-GCS或去除杂质。离心机具有转速可调、操作简便等特点。

    • 注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间等),并确保离心机已平衡。在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况。

  4. 可调式移液器

    • 用途:用于精确移取样品溶液和试剂。可调式移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

    • 注意事项:在使用可调式移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。

  5. 研钵

    • 用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在γ-GCS活性测定实验中,研钵可能用于研磨植物组织或细胞等样品,以便提取其中的γ-GCS。

    • 注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。

    • 用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在γ-GCS活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。

    • 注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。

  6. 蒸馏水

    • 用途:用于配制试剂、稀释样品或清洗仪器等。蒸馏水具有纯净度高、无杂质等特点,是实验中常用的溶剂。

    • 注意事项:在使用蒸馏水时,要确保其质量符合实验要求,并避免受到污染。

XM-F-AS014 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性测定试剂盒说明书-分光法48样.docx

XM-W-AS014 γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性测定试剂盒说明书-微板法96样.docx