硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)试剂盒-可见显色法

ASA-GSH盾环系列


货号

规格

检测方法

目录价

XM-F-AS01548样分光法456
XM-W-AS01596样微板法821






一、产品简介

硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase, TPx)是一种在生物体内广泛存在的过氧化物酶,属于过氧化物酶家族的重要成员。

  1. 定义与功能

    • 定义:TPx是一种具有抗氧化作用的酶,主要通过还原过氧化氢(H2O2)和一些氢过氧化物来实现其生理功能。

    • 功能:TPx的功能与谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)类似,是谷胱甘肽氧化还原循环中的关键酶之一。它参与细胞的抗氧化防御系统,能够清除体内的有害过氧化物,保护细胞免受氧化损伤。此外,TPx还参与调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应,对维持机体的正常生理功能具有重要作用。

  2. 催化机制

    • TPx能够催化H2O2氧化二硫苏糖醇(DTT),生成相应的氧化产物和水。这一反应是TPx实现抗氧化作用的重要途径之一。

    • 在催化过程中,TPx利用其独特的活性位点识别并降解H2O2,从而保护细胞免受氧化应激的损害。

  3. 活性测定方法

    • 本试剂盒采用硫氰酸铁法来检测剩余H2O2的含量,进而计算出TPx的活性大小。

    • 硫氰酸铁法是一种基于化学反应原理的检测方法,其原理是H2O2在酸性条件下与亚铁离子反应生成铁离子,铁离子再与硫氰酸根离子反应生成血红色的硫氰酸铁络合物。该络合物在475nm处有特征吸收峰,通过测定其吸光值可以计算出剩余H2O2的含量。

    • 通过对照实验(即不加TPx的样品)和加入TPx的样品之间的吸光值差异,可以计算出TPx催化H2O2氧化的速率,进而评估TPx的活性大小。

  4. 生理意义与应用

    • TPx在生物体内广泛存在,对维持机体的正常生理功能具有重要作用。其抗氧化功能能够保护细胞免受氧化损伤,延缓衰老过程。

    • TPx还参与调节信号转导和免疫反应,对机体的免疫防御和炎症反应具有重要影响。

    • 在医学领域,TPx的研究有助于深入理解氧化应激相关疾病的发生机制,并为相关疾病的治疗提供新的思路和方法。

二、所需的仪器和用品

进行TPx活性测定实验时,需要以下仪器和用品:

  1. 酶标仪

    • 用途:用于测定硫氰酸铁络合物在475nm处的吸光值。酶标仪具有高精度和高灵敏度的特点,能够准确测定样品在特定波长下的吸光度值。

    • 注意事项:在使用前需要预热酶标仪,并调节波长到475nm。同时,要保持孔板洁净无异物遮盖,以确保测量结果的准确性。

  2. 96孔板

    • 用途:用于盛放待测样品溶液和试剂,便于高通量测定。96孔板具有多个小孔,可以同时处理多个样品,提高实验效率。

    • 注意事项:在使用前需要确保每个小孔都干净无污染,并且样品和试剂的加入量要准确。

  3. 低温离心机

    • 用途:用于分离样品中的固体和液体成分,提取TPx或去除杂质。低温离心机能够在低温条件下进行离心操作,有助于保持样品的活性。

    • 注意事项:在使用前需要设置好离心参数(如转速、时间、温度等),并确保离心机已平衡。在离心过程中,要密切关注离心机有无异常声音等状况。

  4. 移液器

    • 用途:用于精确移取样品溶液和试剂。移液器能够根据不同的实验需求调整移液量,确保实验的准确性和重复性。

    • 注意事项:在使用移液器时,需要确保其已进行校准,并且移液过程中要避免气泡和溅出。在移取不同样品或试剂时,要及时更换移液器头,以防止交叉污染。

  5. 研钵

    • 用途:用于研磨样品,使其达到实验所需的粒度。在TPx活性测定实验中,研钵可能用于研磨植物组织或细胞等样品,以便提取其中的TPx。

    • 注意事项:在使用研钵时,要保持其干净无污染,并确保研磨过程中样品不会受到污染。

    • 用途:用于保持样品在低温条件下,防止其发生降解或变性。在TPx活性测定实验中,冰可能用于冷却样品或试剂,以确保实验的准确性。

    • 注意事项:在使用冰时,要确保其干净无污染,并及时更换以保持其低温效果。

  6. 蒸馏水

    • 用途:用于配制试剂、稀释样品或清洗仪器等。蒸馏水具有纯净度高、无杂质等特点,是实验中常用的溶剂。

    • 注意事项:在使用蒸馏水时,要确保其质量符合实验要求,并避免受到污染。

XM-W-AS015 硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)说明书-微板法96样.docx

XM-F-AS015 硫氧还`白过氧化物酶(TPX)说明书-分光法48样.docx