一、细胞基本属性
细胞名称：人胆囊上皮永生化细胞（Human Immortalized Gallbladder Epithelial Cells）
细胞别称：HIGBEC；永生化胆囊上皮细胞；胆囊上皮永生化株
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无胆囊疾病史）
组织来源：胆囊组织黏膜层
生长特性：贴壁生长（依赖细胞外基质及钙粘蛋白介导连接）
细胞形态：单层铺展，接触抑制后呈多边形或立方状排列
细胞代数：P3 - P8（经STR验证遗传稳定性，适用于连续传代实验）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：Epithelial Cell Medium（含10% FBS + 上皮细胞生长因子添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养密度与生长因子浓度）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床诊疗或动物实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱平衡1小时
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10⁴ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺螯合剂）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下观察细胞边缘卷曲后立即终止
注意事项：
- 严格控制消化时间（避免紧密连接结构破坏）
- 传代后12小时内避免移动培养瓶以确保贴壁
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含8% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于预冷冻存液
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 1h → -80℃ 12h → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞活力（台盼蓝染色存活率≥90%）
- 功能验证：CK19免疫荧光染色（P5代细胞应维持上皮特性）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 5个工作日内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
3. 复苏后细胞贴壁率低于80%（需提供明场显微照片）
4. 基因稳定性检测与STR图谱不符
不予重发情形：
1. 未按规范进行预贴壁处理导致细胞损失
2. 使用非指定培养基或血清浓度超标
3. 未定期进行支原体排查引发交叉污染
4. 液氮储存设备故障导致反复冻融
