一、细胞基本属性
- 细胞名称：猪皮肤成纤维细胞（永生化）
- 细胞别称：永生化皮肤成纤维细胞；SDFB细胞（Swine Dermal Fibroblasts）
- 种属来源：猪（Sus scrofa domesticus）
- 年龄性别：健康幼猪（性别不限，供体筛选无皮肤病及感染史）
- 组织来源：皮肤真皮层（经酶消化法分离纯化）
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
- 细胞形态：典型长梭形或纺锤形，贴壁伸展后呈放射状排列
- 细胞代数：P15 - P30（永生化特性确保长期传代稳定性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS+1%双抗+2mM L - 谷氨酰胺+10ng/mL bFGF）
- 培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~24 - 48小时（永生化特性加速增殖速率）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗、药物生产或转基因动物培育
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置于培养箱平衡1小时
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（贴壁紧密时需及时传代）
- 传代比例：1:3至1:5（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍培养瓶促进细胞脱落
- 注意事项：
- 避免消化过度（损伤细胞膜完整性）
- 传代后48小时内避免频繁移动培养瓶
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及渗透保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10^6 - 3×10^6 cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心收集细胞后轻柔重悬于冻存液
- 梯度降温：4℃ 30分钟→ - 20℃ 2小时→ - 80℃过夜→液氮长期储存
- 复苏验证：
- 复苏后24小时台盼蓝染色存活率≥90%
- 功能验证：细胞增殖能力检测（连续传代3次后仍维持稳定倍增时间）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 7天内证实支原体/真菌污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞复苏存活率低于90%（经台盼蓝染色复检确认）
- 物种鉴定结果与标注不符（需提供STR比对数据）
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行胶原/明胶包被培养
- 自行修改培养基配方导致细胞功能异常
- 解冻后未及时接种或长时间室温放置
- 未定期进行支原体检测而引发交叉污染
