一、细胞基本属性
- 细胞名称：鸡肾小管上皮细胞永生化（Immortalized Chicken Kidney Tubule Epithelial Cells）
- 细胞别称：CKTEC；鸡肾小管细胞；永生化肾上皮细胞
- 种属来源：鸡（Gallus gallus）
- 年龄来源：健康雏鸡（周龄可控，无肾脏疾病史）
- 组织来源：肾脏皮质区小管段
- 生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白包被培养器皿）
- 细胞形态：单层铺展，呈不规则多边形或铺路石样排列
- 细胞代数：P5 - P10（经永生化处理，增殖能力稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含5% FBS+上皮细胞生长因子及转铁蛋白）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂），-150℃以下长期保存
- 增殖速率：~36 - 48小时（依赖培养密度及包被基质）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精表面消毒后静置培养箱1小时，待细胞贴壁后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（建议初始接种密度1×10⁴ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍瓶壁促使细胞脱落。
- 注意事项：
- 避免消化过度（损伤细胞极性结构）。
- 传代后12小时内避免移动培养瓶以确保贴壁。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化离心后重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟 → -20℃ 1小时 → -80℃ 过夜 → 液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测细胞活性（台盼蓝拒染率≥90%）。
- 功能验证：钠钾ATP酶活性检测（P5代细胞活性需≥80%）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 物流温度异常导致细胞失活（需提供冷链记录）。
- 到货48小时内证实微生物污染（需提供检测证据）。
- 复苏存活率低于85%（按规范流程复测确认）。
- 物种鉴定与标注不符（STR比对验证）。
- 不予重发情形：
- 未按说明书进行预包被处理导致贴壁失败。
- 自行更换培养基成分引发细胞功能异常。
- 反复冻融或超时保存导致的细胞损伤。
- 未定期进行支原体筛查造成后续污染扩散。
（注：以上内容基于标准操作流程编写，具体实验条件需根据研究需求优化调整。）
