一、细胞基本属性
- 细胞名称：永生化小鼠角膜基质细胞（Immortalized Mouse Corneal Stromal Cells）
- 细胞别称：iMCSC；小鼠角膜成纤维细胞；角膜基质细胞
- 种属来源：小鼠（Mus musculus）
- 年龄性别：健康幼鼠（性别不限，供体无眼部疾病史）
- 组织来源：角膜基质层组织
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白涂层培养器皿）
- 细胞形态：长梭形或星状，融合后呈网状交织结构
- 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，遗传性状稳定）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：DMEM/F12（含10% FBS + 1% ITS添加剂+0.1%抗坏血酸）
- 培养条件：气相：5% CO₂+ 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂），-150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（与培养基批次及传代密度相关）
- 供应限制：仅限体外研究使用，不可用于活体移植或药物生产
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基。
- 培养瓶：酒精消毒后静置培养箱1小时，待温度稳定后换液。
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代）
- 传代比例：1:3至1:4（初始接种密度建议3×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA（含0.02%胶原酶）。
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞完全脱离。
- 注意事项：
- 避免消化时间过长（防止细胞外基质过度降解）。
- 传代后12小时内避免频繁观察，减少机械扰动。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO + 10% FBS+1%葡萄糖）
- 细胞密度：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 离心后重悬于冻存液，分装至冻存管。
- 程序降温：4℃ 30分钟→ - 80℃过夜→液氮长期储存。
- 复苏验证：
- 复苏后存活率≥90%（台盼蓝染色法）。
- 功能验证：Ⅰ型胶原分泌检测（P8代细胞应保持分泌能力）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供温度记录证明）。
- 5天内证实真菌/细菌污染（需提供污染检测图像）。
- 细胞活性低于85%（经双盲检测确认）。
- 永生化标志基因（如SV40大T抗原）PCR验证不通过。
- 不予重发情形：
- 未按说明书要求进行胶原涂层预处理。
- 使用含血清浓度低于5%的培养基培养。
- 超代次使用（P15以上未重新验证功能）。
- 未定期检测支原体导致实验数据异常
