一、细胞基本属性
细胞名称：小鼠内皮祖细胞（永生化）
细胞别称：永生化内皮祖细胞；EPC - SV40
种属来源：小鼠（Mus musculus）
年龄性别：健康成年鼠（性别均一化处理）
组织来源：骨髓/外周血来源内皮祖细胞
生长特性：贴壁生长（需纤连蛋白包被培养器皿）
细胞形态：纺锤形或多角形，汇合后呈铺路石样排列
细胞代数：稳定传代至P15代（SV40大T抗原介导永生化）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（无血清冻存体系）
培养基：EGM - 2 MV培养基（含5% FBS及内皮祖细胞特异性添加因子）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无动物源冻存液（含7.5% DMSO+海藻糖），液氮气相长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（需定期验证端粒酶活性）
供应限制：研究级细胞（不可用于体内植入或基因治疗开发）
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴轻柔摇晃解冻，加入5mL预温培养基离心去冻存液
- 贴壁瓶：直接置于CO₂培养箱平衡4小时后换液
传代标准：融合度达80% - 85%（永生化细胞需控制传代密度）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - 0.02% EDTA溶液
- 37℃消化2 - 3分钟，机械轻拍促进脱壁
注意事项：
- 传代后6小时内避免移动培养瓶（保障贴壁稳定性）
- 每周进行CD34/CD133免疫荧光验证干细胞特性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（7.5% DMSO+10%海藻糖）
细胞密度：1×10^6 - 1.5×10^6 cells/mL
冻存步骤：
- 4℃预冷15分钟后分装至冻存管
- 程序降温仪梯度冷冻：每分钟降1℃至 - 80℃
- 24小时内转移至液氮罐气相层
复苏验证：
- 台盼蓝染色存活率≥90%
- 成管实验检测：Matrigel基质中保持血管生成能力
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 干冰运输箱温度记录＞ - 130℃（需提供温度记录曲线）
2. 到货48小时内PCR检测支原体阳性（需提交电泳图）
3. 永生化标志物SV40抗原检测阴性（提供Western blot原始数据）
4. 细胞增殖速率异常（传代周期超过72小时）
不予重发情形：
1. 未使用指定包被基质导致贴壁失败
2. 擅自改用高浓度血清培养基（＞10%）
3. 液氮储存罐定期补液记录缺失
4. 未按规范进行端粒酶活性监测
注：所有细胞均附永生化建系报告（包含STR分型及致瘤性检测数据），实验操作需遵守Ⅱ级生物安全规范。
