一、细胞基本属性
- 细胞名称：大鼠海绵体内皮细胞永生化株
- 细胞别称：RCCEC；海绵体内皮细胞；阴茎海绵体微血管内皮细胞
- 种属来源：大鼠（Rattus norvegicus）
- 年龄性别：健康成年雄性大鼠（供体筛选无生殖系统疾病史）
- 组织来源：阴茎海绵体微血管段
- 生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
- 细胞形态：典型单层铺路石样排列，接触抑制后呈多角形
- 细胞代数：P5 - P20（永生化特性确保长期稳定传代）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：内皮细胞专用培养基（含5% FBS+内皮生长因子及永生化维持因子）
- 培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂）， -150℃以下长期保存
- 倍增时间：~36 - 48小时（依赖培养基成分及传代密度）
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床或动物体内实验
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入预热的培养基离心洗涤后接种
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后直接置于37℃培养箱平衡
- 传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰酶 - EDTA（含Ca²⁺/Mg²⁺缓冲液）
- 37℃消化30 - 60秒，轻拍培养瓶促使细胞脱落后立即终止
- 注意事项：
- 避免消化过度（防止细胞间连接蛋白降解）
- 传代后6小时内避免频繁观察以降低机械应力损伤
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
- 细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
- 冻存步骤：
- 消化收集细胞，离心后重悬于冻存液分装至冻存管
- 程序降温：4℃ 30min → -20℃ 2h → -80℃ 12h → 液氮长期保存
- 复苏验证：
- 复苏后12小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：eNOS活性检测（P10代细胞应保持一氧化氮合成功能）
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输过程温度异常导致细胞失活（需提供物流温度记录）
- 到货48小时内证实微生物污染（需提供第三方检测报告）
- 细胞永生化标记基因表达缺失（需提供RT - PCR结果）
- 种属鉴定与大鼠不符（STR分析结果为准）
- 不予重发情形：
- 未按推荐方法进行基质包被导致贴壁失败
- 使用非指定培养基或血清成分影响细胞特性
- 自行转染或基因编辑导致功能异常
- 未按要求进行定期支原体检测引发实验污染
本产品通过SV40大T抗原转染实现永生化，保留内皮细胞特异性标志物（CD31/vWF阳性），适用于海绵体血管功能及药物筛选研究。
