一、细胞基本属性
细胞名称：人成骨细胞永生化细胞株
细胞别称：HOB - immortalized；永生化成骨细胞；人成骨细胞系
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成人（性别不限，供体筛选无骨代谢疾病史）
组织来源：骨组织（骨髓或骨膜来源）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白或纤连蛋白包被）
细胞形态：长梭形或多角形，成骨分化后可见矿化结节
细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，遗传稳定性与功能一致性可控）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：DMEM高糖培养基（含10% FBS + 1%抗坏血酸+10mM β -甘油磷酸钠）
培养条件：气相：5% CO₂+95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：~24 - 48小时（永生化后增殖速率稳定）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或药物开发
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：75%酒精表面消毒后静置培养箱2小时平衡
传代标准：细胞融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代一次）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25% Trypsin - EDTA（含0.02% EDTA）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻拍培养瓶促使细胞脱落
注意事项：
- 消化终止需立即加入含血清培养基
- 避免频繁传代导致成骨分化潜能降低
- 传代后48小时内观察细胞贴壁及形态恢复
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂）
细胞密度：冻存浓度1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心后重悬于预冷冻存液
- 梯度降温程序：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮长期保存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测细胞存活率（台盼蓝染色≥90%）
- 功能验证：碱性磷酸酶活性检测（P8代细胞应维持成骨分化潜能）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度追踪报告）
2. 7天内经qPCR证实支原体污染（需提供完整检测数据）
3. 细胞复苏后活力低于85%（需提供台盼蓝染色图像）
4. 成骨分化标志物（如OCN、RUNX2）表达缺失
不予重发情形：
1. 使用非标准培养基（如未添加成骨诱导剂）
2. 未按规范进行传代导致细胞衰老
3. 自行转染或基因编辑后功能异常
4. 超过推荐代数（P15）后细胞特性改变
（注：本产品经SV40大T抗原永生化处理，保留成骨细胞特异性标记物表达及矿化能力，适用于骨代谢研究、药物筛选及骨组织工程实验）
