一、细胞基本属性
细胞名称:小鼠肝星状细胞永生化(Immortalized Mouse Hepatic Stellate Cells)
细胞别称:iHSC;永生化肝星状细胞;活化肝星状细胞
种属来源:小鼠(Mus musculus)
年龄性别:健康成年鼠(性别不限,供体无肝脏病理改变)
组织来源:肝脏组织经胶原酶灌注分离
生长特性:贴壁生长(依赖细胞外基质胶包被)
细胞形态:活化后呈纺锤形或星状突起,融合后呈长梭形
细胞代数:P5 - P15(经永生化处理,增殖能力稳定)
细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)
培养基:Stellate Cell Medium(含10% FBS+肝星状细胞特异性添加剂)
培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),- 150℃以下长期保存
倍增时间:~36 - 48小时(活化后增殖速率提升)
供应限制:仅限体外研究使用,不可用于临床或活体移植
二、细胞培养操作指南
收货处理:
- 冻存管:37℃水浴快速解冻,加5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶:75%酒精表面消毒后静置培养箱1小时适应
传代标准:细胞融合度达80% - 90%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:3至1:4(推荐接种密度4×10³ cells/cm²)
消化方法:
- 使用0.25% Trypsin - EDTA(含0.1%胶原酶)
- 37℃消化2 - 3分钟,镜下观察细胞边缘卷曲后终止
注意事项:
- 避免机械刮取(保护细胞伪足结构)
- 传代后12小时补充新鲜培养基以稳定细胞活性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO及海藻糖保护剂)
细胞密度:冻存浓度:1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤:
- 离心后轻柔重悬细胞于预冷冻存液
- 程序降温:4℃ 20min → - 80℃ 24h → 转入液氮长期保存
复苏验证:
- 复苏后12小时台盼蓝染色检测存活率(标准≥90%)
- 功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P8代细胞应维持活化表型)
四、售后服务承诺
重发标准:
1. 物流温度记录异常导致细胞失活(需提供运输温度曲线)
2. 5天内证实微生物污染(需提供污染检测原始数据)
3. 细胞复苏活力低于85%(经双盲法台盼蓝检测确认)
4. 永生化标记基因PCR验证未通过
不予重发情形:
1. 未使用指定基质胶导致细胞贴壁失败
2. 擅自添加TGF - β等诱导剂引发过度活化
3. 培养容器未包被胶原导致形态异常
4. 未按规范进行细胞周期性传代维护
(注:本产品通过SV40大T抗原转染实现永生化,保留原代细胞收缩功能及脂滴储存能力,适用于肝纤维化机制研究、药物筛选及共培养模型构建)