一、细胞基本属性
细胞名称：永生化人软骨细胞（Immortalized Human Chondrocytes）
细胞别称：IHCC；SV40转染软骨细胞；永生化关节软骨细胞
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：成年供体（性别及年龄信息可溯源，无骨关节疾病史）
组织来源：关节软骨组织（经伦理审查及供体知情同意）
生长特性：贴壁生长（需胶原蛋白或明胶包被培养器皿）
细胞形态：多角形至梭形，单层贴壁后呈铺路石样排列
细胞代数：P5 - P20（经永生化处理，增殖能力稳定）
细胞规格：1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：软骨细胞专用培养基（含10% FBS及TGF - β1、胰岛素等添加剂）
培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及海藻糖保护剂），液氮长期保存
倍增时间：约36 - 48小时（与传代密度及培养基批次相关）
供应限制：仅用于基础研究，禁止临床应用或体内实验
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置培养箱4小时恢复代谢
传代标准：融合度达80% - 90%（建议每2 - 3天传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐接种密度1×10^4 cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.1%胶原酶）
- 37℃消化3 - 5分钟，轻柔吹打至细胞完全脱离
注意事项：
- 传代后12小时需补加5ng/mL FGF - 2以维持表型
- 避免频繁换液（软骨细胞分泌的ECM对自分泌信号至关重要）
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及胎牛血清替代物）
细胞密度：5×10^6 - 1×10^7 cells/mL（高密度冻存提升复苏效率）
冻存步骤：
- 4℃预冷细胞悬液10分钟
- 程序降温： - 80℃过夜后转移至液氮气相层
复苏验证：
- 复苏后48小时检测Ⅱ型胶原表达（免疫荧光法≥90%）
- 功能验证：阿利新蓝染色法确认蛋白聚糖分泌能力
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输温度记录异常导致细胞失活（需提供物流温度监控报告）
2. 72小时内经qPCR证实支原体污染
3. STR分型与数据库记录不一致（需提供第三方检测报告）
4. 细胞复苏存活率低于85%（台盼蓝染色复检确认）
不予重发情形：
1. 使用非配套培养基或自行修改添加剂配方
2. 未按规范进行胶原酶辅助消化导致细胞损伤
3. 实验过程中接触地塞米松等诱导分化试剂
4. 液氮储存中断超过24小时导致重复冻融
（注：本产品经SV40大T抗原转染实现永生化，保留软骨细胞特异性标记物表达能力，适用于骨关节炎机制研究、药物筛选及组织工程研究。）
