一、细胞基本属性
细胞名称：人乳腺上皮细胞永生化（Human Mammary Epithelial Cells Immortalized）
细胞别称：HMEC - Immortalized；永生化乳腺上皮细胞；乳腺上皮细胞系
种属来源：人（Homo sapiens）
年龄性别：健康成年女性（供体筛选无乳腺疾病史）
组织来源：正常乳腺组织（手术切除样本，经伦理审查批准）
生长特性：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被基质）
细胞形态：单层铺展呈铺路石样，细胞核质比适中，边界清晰
细胞代数：P3 - P10（经端粒酶活性验证，增殖能力稳定）
细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基：乳腺上皮细胞专用培养基（含5% FBS+EGF+氢化可的松+胰岛素）
培养条件：气相：5% CO₂ + 95%空气；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），-150℃以下长期保存
倍增时间：约48 - 60小时（依赖培养基批次及接种密度）
供应限制：仅限科研用途，不可用于临床治疗或生物医药生产
二、细胞培养操作指南
收货处理：
- 冻存管：37℃水浴解冻后转移至15mL离心管，加入5mL预热培养基轻柔混匀
- 培养瓶：酒精消毒表面，静置于培养箱1小时稳定后换液
传代标准：融合度达80% - 90%（建议每3 - 5天传代）
传代比例：1:3至1:4（推荐初始接种密度3×10³ cells/cm²）
消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含0.02% EDTA）
- 37℃消化2 - 3分钟，镜下确认细胞间隙增大后终止
注意事项：
- 避免机械吹打过度（保护细胞表面黏附分子）
- 首次传代后48小时内观察贴壁稳定性
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO+90%基础培养基）
细胞密度：冻存浓度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL
冻存步骤：
- 离心收集细胞，重悬于预冷冻存液
- 分装至冻存管后按程序降温：4℃ 30min → - 20℃ 2h → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证：
- 复苏后48小时检测贴壁率（≥85%为合格）
- 功能验证：CK18免疫荧光染色（阳性率＞95%）
四、售后服务承诺
重发标准：
1. 运输过程中干冰耗尽导致细胞失活（需提供物流温度记录）
2. 到货7日内经PCR证实支原体污染
3. 复苏后存活率低于85%（需提供台盼蓝染色视频）
4. 核型分析显示非人源或异常染色体
不予重发情形：
1. 未按说明书进行胶原包被直接接种
2. 使用含高浓度抗生素的培养基培养
3. 未定期进行支原体检测导致交叉污染
4. 液氮储存中断超过24小时
