人甲状旁腺细胞永生化

原代细胞永生化

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XM-X06861×10^6原代细胞永生化3500


一、细胞基本属性

- 细胞名称:人甲状旁腺细胞永生化(Immortalized Human Parathyroid Cells)

- 细胞别称:iHPTC;甲状旁腺上皮细胞;永生化甲状旁腺细胞

- 种属来源:人(Homo sapiens)

- 年龄性别:健康成人(性别不限,供体筛选无甲状旁腺疾病史)

- 组织来源:甲状旁腺组织

- 生长特性:贴壁生长(需胶原蛋白包被培养器皿)

- 细胞形态:多角形或铺路石样单层排列,核质比适中

- 细胞代数:P10 - P20(经SV40永生化处理,遗传稳定性已验证)

- 细胞规格:1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管(含无血清冻存液)

- 培养基:甲状旁腺专用培养基(含1.2mM钙离子+甲状旁腺激素分泌促进因子)

- 培养条件:气相:5% CO₂ + 95%空气;温度:37℃;湿度:95%

- 冻存条件:无血清冻存液(含10% DMSO及细胞膜保护剂),液氮长期保存

- 增殖能力:稳定表达PTH分泌功能(传代20代内分泌活性保持≥85%)

- 应用限制:仅供体外研究使用,不可用于临床治疗或体内移植


二、细胞培养操作指南

- 收货处理:

    - 冻存管:37℃水浴快速复苏,离心去除冻存液后重悬于预热培养基

    - 培养瓶:表面消毒后直接置于CO₂培养箱平衡1小时

- 传代标准:细胞融合度达80%-90%(推荐传代周期4 - 5天)

- 传代比例:1:3至1:4(维持钙离子浓度1.0 - 1.5mM以支持功能表达)

- 消化方法:

    - 使用0.02%胶原酶+0.01% EDTA复合消化液

    - 37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至细胞间隙扩大

- 关键控制点:

    - 传代后需24小时钙离子浓度梯度调整(从1.0mM逐步升至1.2mM)

    - 定期检测培养基PTH分泌量(ELISA法评估细胞功能)


三、细胞冻存操作规范

- 冻存液配方:无血清冻存液(含10% DMSO+钙离子螯合剂)

- 冻存密度:5×10^5 - 1×10^6 cells/mL(高密度维持细胞间信号)

- 程序优化:

    - 梯度降温程序:4℃平衡30分钟→程序降温仪(-1℃/min)→液氮储存

- 复苏验证:

    - 复苏后48小时进行功能检测(PTH基础分泌量≥50pg/10^4 cells)

    - 钙离子响应测试:0.8mM低钙刺激下PTH分泌增幅需≥3倍


四、售后服务承诺

- 质量保证:

    - 每批次提供STR鉴定报告及PTH分泌功能检测数据

    - 支原体检测阴性承诺(PCR法+培养法双验证)

    - 液氮运输全程温控记录可追溯

- 重发条款:

    - 到货24小时内反馈问题并提供:温度记录、污染证据、活力检测视频

    - 功能不达标可申请复检或更换批次(需保留原始培养基及检测样本)

- 免责声明:

    - 使用非指定培养基导致的钙离子紊乱或功能丧失

    - 擅自修改培养参数引发的细胞去分化现象

    - 超过推荐传代代次导致的功能衰减