一、细胞基本属性:
细胞名称:人卵巢癌相关成纤维细胞永生化(Human Ovarian Cancer - Associated Fibroblasts, Immortalized)
细胞别称:HO - CAFs;卵巢癌CAFs;肿瘤相关成纤维细胞
种属来源:人(Homo sapiens)
年龄性别:卵巢癌患者(临床病理信息明确,经伦理审查)
组织来源:卵巢肿瘤组织间质(原发灶经病理确诊)
生长特性:贴壁生长(依赖纤维连接蛋白包被)
细胞形态:长梭形或星状,胞质伸展明显,单层贴壁
细胞代数:P5 - P10(经永生化处理,增殖能力稳定)
细胞规格:5×10^5 cells/T25培养瓶 或 1mL冻存管(含专用冻存液)
培养基:成纤维细胞专用培养基(含10% FBS+碱性成纤维细胞生长因子)
培养条件:气相:5% CO₂;温度:37℃;湿度:95%
冻存条件:无血清冻存液(含DMSO及细胞保护剂),液氮长期保存
倍增时间:约36 - 48小时(与培养密度及激活状态相关)
供应限制:仅限肿瘤微环境研究,禁止临床或体内移植
二、细胞培养操作指南:
收货处理:冻存管:37℃水浴快速解冻,离心后重悬于预热培养基;培养瓶:酒精消毒外壁,静置4小时待细胞贴壁
传代标准:融合度达90% - 95%(建议每2 - 3天传代)
传代比例:1:2至1:3(推荐初始密度1×10^4 cells/cm²)
消化方法:使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液,37℃消化3 - 5分钟,轻柔吹打至完全分离
注意事项:避免多次离心损伤细胞骨架;首次传代后48小时内勿更换培养基
三、细胞冻存操作规范:
冻存液配方:专用无血清冻存液(含10% DMSO+海藻糖)
细胞密度:冻存浓度:2×10^6 cells/mL
冻存步骤:预冷冻存管至4℃,分装后程序降温:4℃平衡30分钟 → - 80℃过夜 → 液氮储存
复苏验证:存活率≥85%(台盼蓝染色法);功能验证:α - SMA免疫荧光染色(P8代仍保持活化表型)
四、售后服务承诺:
重发标准:1. 运输温度异常导致细胞失活(需提供物流温度记录);2. 7日内证实支原体污染(提供第三方检测报告);3. STR分型与存档数据不一致;4. 胶原分泌功能检测未达标
不予重发情形:1. 未使用配套培养基导致表型漂移;2. 未按规范进行TGF - β信号通路激活;3. 冻存管反复冻融超过2次;4. 用于非肿瘤微环境相关实验场景