一、细胞基本属性
细胞名称 ：人骨骼肌细胞永生化（Immortalized Human Skeletal Myocytes）
细胞别称 ：iHSkM；永生化骨骼肌细胞；肌原细胞系
种属来源 ：人（Homo sapiens）
年龄性别 ：健康成人（性别不限，供体无神经肌肉疾病史）
组织来源 ：骨骼肌组织（经伦理审查的活检样本）
生长特性 ：贴壁生长（依赖胶原蛋白包被表面）
细胞形态 ：单核梭形，分化后融合为多核肌管
细胞代数 ：P5 - P20（经端粒酶活性验证，增殖能力稳定）
细胞规格 ：1×10⁵ cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
培养基 ：骨骼肌细胞专用培养基（含5% FBS+成肌细胞生长因子）
培养条件 ：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
冻存条件 ：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞膜稳定剂），液氮长期保存
倍增时间 ：~24 - 36小时（未分化状态，依赖生长因子浓度）
供应限制 ：仅限基础研究，不可用于临床、药物筛选或体内移植
二、细胞培养操作指南
收货处理 ：冻存管：37℃水浴解冻后转移至15mL离心管，加5mL培养基轻柔混匀离心（200g，5分钟），弃上清后重悬接种。培养瓶：酒精擦拭外壁，静置培养箱4小时待细胞贴壁后换液。
传代标准 ：融合度达70% - 80%（高密度可能自发启动分化程序）。
传代比例 ：1:3至1:4（推荐接种密度3×10³ cells/cm²）。
消化方法 ：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA，37℃消化3 - 5分钟，加入含血清培养基终止。
注意事项 ：分化诱导需切换至低血清培养基（2% HS），避免频繁振动干扰肌管形成。
三、细胞冻存操作规范
冻存液配方 ：无血清冻存液（含10% DMSO、20% FBS及海藻糖）。
细胞密度 ：冻存浓度：5×10⁵ - 1×10⁶ cells/mL。
冻存步骤 ：细胞悬液与冻存液按1:1混合，程序降温：4℃ 30分钟 → -80℃ 过夜 → 液氮储存。
复苏验证 ：存活率≥90%（台盼蓝检测），分化能力验证：α - actinin免疫荧光染色确认肌节结构形成。
四、售后服务承诺
重发标准 ：1. 干冰耗尽或运输温度异常（需提供物流温度记录）；2. 到货48小时内经qPCR证实支原体污染；3. 细胞复苏后活性＜85%且操作符合规范；4. 核型分析结果与备案数据不符。
不予重发情形 ：1. 使用胎牛血清替代指定生长因子添加剂；2. 未预包被胶原直接接种导致贴壁失败；3. 未按时换液引发培养基酸化损伤细胞；4. 超出P20代次后出现增殖能力下降。
