一、细胞基本属性
- 细胞名称：人淋巴管内皮细胞永生化（Immortalized Human Lymphatic Endothelial Cells）。
- 细胞别称：HLEC - Imm；永生化淋巴管内皮细胞；淋巴管内皮细胞系。
- 种属来源：人（Homo sapiens）。
- 年龄性别：健康成人（性别不限，供体无淋巴系统疾病史）。
- 组织来源：淋巴管组织（经伦理审查合规获取）。
- 生长特性：贴壁生长（依赖纤维连接蛋白或胶原基质）。
- 细胞形态：单层铺展呈梭形或多角形，接触抑制后形成典型内皮铺路石样排列。
- 细胞代数：P5 - P20（永生化特性确保遗传稳定性与高增殖活性）。
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）。
- 培养基：专用淋巴管内皮细胞培养基（含2% FBS+内皮生长因子及永生化维持组分）。
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%。
- 冻存条件：无血清冻存液（含10% DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存（-150℃以下）。
- 倍增时间：约36 - 48小时（因培养密度及传代操作而异）。
- 供应限制：仅限科研用途，不可用于临床、药物生产或动物移植。
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻后，转移至含5mL预热培养基的离心管，轻柔混匀离心去冻存液。
- 培养瓶：酒精擦拭表面后直接置于CO₂培养箱，静置4小时再更换培养基。
- 传代标准：融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）。
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度4×10³ cells/cm²）。
- 消化方法：使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液，37℃消化1.5 - 2分钟，显微镜下确认细胞边缘卷曲后立即加入含血清培养基终止。
- 注意事项：避免消化过度导致VEGFR - 3受体脱落；传代后首次换液需彻底清除残余消化酶。
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO、40%基础培养基及50%胎牛血清）。
- 细胞密度：建议冻存浓度1×10⁶ - 2×10⁶ cells/mL。
- 冻存步骤：消化离心后重悬细胞，分装至冻存管；程序降温：4℃ 30分钟→-80℃ 24小时→液氮气相长期储存。
- 复苏验证：复苏后存活率≥90%（台盼蓝法）；功能验证需通过LYVE - 1免疫荧光标记及体外成管实验（P10代内保持活性）。
四、售后服务承诺
- 重发标准：
- 运输温度异常导致细胞死亡（需提供物流温度记录证明）。
- 到货72小时内经qPCR证实支原体污染。
- 细胞复苏存活率低于90%（需提供台盼蓝检测视频）。
- STR基因分型与备案数据不符。
- 不予重发情形：
- 客户未按规范使用指定培养基或生长基质。
- 细胞冻存后未及时转移至液氮导致反复冻融。
- 实验操作污染（如未在超净台操作）。
- 超出建议代次（P20）仍要求质保。
