一、细胞基本属性
- 细胞名称：猪主动脉内皮细胞永生化（Immortalized Porcine Aortic Endothelial Cells）
- 细胞别称：iPAEC；主动脉内皮细胞；永生化内皮细胞
- 种属来源：猪（Sus scrofa domesticus）
- 年龄性别：健康成年猪（性别不限，供体经心血管健康筛选）
- 组织来源：主动脉血管段（经无菌分离及内皮层特异性提取）
- 生长特性：贴壁生长（需包被明胶或纤维连接蛋白基质）
- 细胞形态：单层铺展呈鹅卵石样，接触抑制后呈现规则多边形
- 细胞代数：P5 - P15（经永生化处理，维持稳定增殖及功能特性）
- 细胞规格：1×10^5 cells/T25培养瓶或1mL冻存管（含无血清冻存液）
- 培养基：猪内皮细胞专用培养基（含5% FBS+内皮生长因子及抗生素）
- 培养条件：气相：5% CO₂；温度：37℃；湿度：95%
- 冻存条件：无血清冻存液（含DMSO及细胞保护剂），液氮长期保存
- 增殖特性：倍增时间约36 - 48小时（与培养密度及基质条件相关）
- 应用限制：限科学研究使用，禁止临床或动物体内应用
二、细胞培养操作指南
- 收货处理：
- 冻存管：37℃水浴快速解冻，离心去冻存液后重悬于预热培养基
- 培养瓶：酒精消毒外壁，静置培养箱1小时适应后换液
- 传代标准：融合度达80% - 90%（推荐每2 - 3天传代一次）
- 传代比例：1:3至1:4（建议接种密度4×10³ cells/cm²）
- 消化方法：
- 使用0.25%胰蛋白酶 - EDTA溶液（含酚红指示）
- 37℃消化2 - 3分钟，轻拍瓶壁至细胞脱落后终止消化
- 注意事项：
- 传代后6小时内避免频繁观察（减少物理扰动）
- 首次换液需保留50%原培养基以维持细胞适应性
三、细胞冻存操作规范
- 冻存液配方：无血清冻存液（含10% DMSO及葡萄糖缓冲体系）
- 细胞密度：1×10⁶ - 3×10⁶ cells/mL（离心后重悬）
- 冻存步骤：
- 4℃预冷10分钟，转移至程序降温盒（-1℃/分钟）
- -80℃过夜后转入气相液氮长期保存
- 质控检测：
- 复苏存活率≥90%（台盼蓝染色法）
- 功能验证：Ⅷ因子相关抗原免疫荧光染色（P8代细胞阳性率≥98%）
四、售后服务承诺
- 重发条款：
- 到货干冰耗尽或细胞瓶破裂（需提供到货状态影像）
- 7日内经qPCR证实支原体污染
- 细胞复苏存活率低于85%（需提供染色检测记录）
- 永生化标志物（如SV40 T抗原）检测阴性
- 免责情形：
- 未按规范进行预包被导致贴壁失败
- 使用非配套培养基引发功能异常
- 液氮储存罐温度记录不全影响冻存质量追溯
- 超代次（P15以上）使用导致的性能衰减
